乐莉,张亚青,宋尔群,陶晓奇*

1(西南大学 食品科学学院,重庆,400715) 2(西南大学 药学院,重庆,400715)

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染家猪和野猪引起的一种急性出血性严重传染病。其主要特点是病程短、高热、皮肤及内脏出血、急性感染死亡率高[1]。世界动物卫生组织已将ASF列为A类动物传染病,目前尚无有效的预防疫苗[2]。ASF的持续传播不仅影响到居民的肉类供应,也影响到全球肉类供应的安全[3]。

目前检测ASFV的金标准检测方法是病毒分离,但存在耗时长、成本高等不足[4]。血清学检测也是检测ASFV的主要方法[5],如ELISA和荧光抗体试验,但是不适合早期、快速检测ASFV (抗体在感染后约14 d产生,检测过程存在延迟)[6-7]。胶体金技术虽然快速简单,但是灵敏度相对较低[8]。分子生物学方法比如PCR[9]、实时PCR[10],逆转录PCR[11-12]和线性指数PCR[13]因其高灵敏度被广泛应用于检测ASFV。然而,PCR方法存在耗时、设备昂贵和容易出现假阳性结果等问题。目前也出现了一些用于ASFV检测的等温扩增技术,环介导等温扩增[14-15],重组酶聚合酶扩增[16]和交叉引物扩增[17]方法简单、快速,但是存在假阳性结果和相对复杂的末端检测。以上方法大部分用于猪血、脏器等临床标本。目前有关直接检测食品中ASFV的研究很少,在日常食品中检测出ASFV可以追踪病毒来源,更广泛地监测病毒,进一步减少经济损失。

荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)是一对光敏分子之间的非辐射能量转移过程。FRET是一种与距离有关的物理现象,能量通过分子内的偶极-偶极相互作用从激发的供体荧光团转移到受体荧光团。……