解天慧,石慧

(西南大学 食品科学学院,重庆,400715)

大肠杆菌O157∶H7是肠出血性大肠杆菌中最典型的一种食源性致病菌,因产生志贺毒素从而引起腹泻、出血性结肠炎、溶血性尿毒综合症等疾病,严重时有可能导致死亡[1-2]。但用抗生素控制大肠杆菌O157∶H7存在争议,因为抗生素可能导致志贺毒素被大量释放[3]。临床实验表明,抗生素治疗可能增加溶血性尿毒综合症的风险[3-4]。另外,抗生素的滥用致使耐药性大肠杆菌O157的数量增加[3,5]。因此,寻找新型的抗菌物质刻不容缓。

近几年,噬菌体作为一种新型的抑菌剂开始被大量研究,食源性致病菌的噬菌体被分离,并应用于医疗、食品等多个领域[3,6-7]。但噬菌体作为活体病毒,不易保存且不易被人们接受,而具有抑菌作用的内溶酶和穿孔素能很好地解决这些问题[8]。穿孔素和内溶酶在噬菌体裂解细菌中发挥着重要的作用,“穿孔素-内溶酶”裂解体系是dsDNA噬菌体经典的裂解系统[9-10]。内溶酶是一种由dsDNA噬菌体编码的酶,可降解细菌的肽聚糖并导致细菌死亡[8,11]。高效、抑菌谱宽、不容易产生耐药性等优点使内溶酶开始应用于医疗、食品安全、病原菌检测等各个方面[8,11-12]。穿孔素是一种含有跨膜结构的疏水蛋白。在噬菌体裂解细菌过程中,通过在细胞膜上形成孔径,协助内溶酶与肽聚糖接触[13]。

本实验分离得到1株大肠杆菌O157∶H7噬菌体EC-p9，通过十聚体寡核苷酸随机引物PCR扩增对该噬菌体进行初步鉴定,并通过生物信息学对该噬菌体的内溶酶和穿孔素的生理特征及跨膜结构等进行预测。……