◎ 田露露，蒋德意，韩 迪

（润盈生物工程（上海）有限公司，上海 201700）

青春双歧杆菌有免疫调节作用，可以缓解免疫衰老带来的有害作用及衰老相关的病理作用，因而可以抵制与衰老相关的疾病。青春双歧杆菌是主要产 γ-氨基丁酸的菌，因而作用于肠-脑轴[1-3]。青春双歧杆菌是严格厌氧菌，培养条件要求苛刻，而且培养基成分对其生长影响很大，因而体外培养很难达到较高的活菌数[4]。

双歧杆菌培养基中的主要影响因素有碳源、氮源、还原剂、生长因子等，培养基中碳源一般由葡萄糖，乳糖等提供，氮源一般有胰蛋白胨、蛋白胨、酵母抽提物等[4]。L-半胱氨酸可以降低氧气的抑制作用[4]。无机盐类比如铁、镁、锌、钙、锰等元素的盐都是其生长必不可少的[5-6]。主要生长因子还有低聚糖类，如低聚果糖，低聚半乳糖等；蛋白质水解产物及一些蛋白质类物质，如乳清蛋白、酪蛋白水解产物、酵母提取液、牛肉浸液、大豆胰蛋白酶水解产物、糖多肽等[4]。

提高双歧杆菌活菌量的主要途径有改进培养基成分；通过耐氧驯化，降低培养条件；改进保护剂等，目前已有青春双歧杆菌培养工艺的优化研究，多数集中在发酵培养基及冻干保护剂的研究，且活菌数低，仅为109cfu·mL-1[4-10]。本文从生产工艺的各个方面，如发酵、计数、冻干等方面确定最佳参数，从而提高冻干粉中青春双歧杆菌的活菌数。

1 材料与方法

1.1 材料

青春双歧杆菌，润盈生物工程（上海）有限公司提供；TPY培养基、BBL培养基，青岛海博；蛋白胨、牛肉……