樊雪，吴铮，王一平，李璇，周荔葆

辽宁成大生物股份有限公司研发部，辽宁沈阳110179

四价流感病毒裂解疫苗系用甲型和乙型流感病毒株（每型各两种病毒株型）接种于鸡胚培养适宜时间后，收获病毒液，再经病毒灭活、纯化、裂解等工艺步骤后配制而成。在临床上用于预防由这4种病毒株型导致的流行性感冒。在生物制品生产工艺过程中，常将Triton X-100作为裂解剂或灭活剂，而Triton X-100本身具有一定的刺激性，残留的Triton X-100需在后续纯化工艺步骤中去除［1-2］。在流感病毒裂解疫苗生产工艺过程中，加入了Triton X-100对病毒进行裂解［3］，后续工艺中可能会有部分残留，《中国药典》三部（2015版）对其残留量进行了明确的规定［4］，因此，需对其工艺过程中的Triton X-100残留量进行检测。《中国药典》三部（2015版）“重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）”项下的Triton X-100残留量检测采用的是比浊法，将标准品和供试品与苯酚反应，生成具有一定浊度的复合物，其浓度与吸光度值正比［5］。但比浊法的专属性、灵敏度、准确度较差，要求供试品本身没有浊度，否则将会干扰测定。而高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）具有较高的专属性、灵敏度、精密度和准确度［6-7］。

本研究建立了适用于四价流感病毒裂解疫苗中Triton X-100残留量检测的HPLC法，对方法进行验证，并与比浊法进行对比［8］，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 疫苗原液 流感病毒裂解疫苗原液（批号：2018-1225、20181226、20181227）由辽宁成大生物股份有限公司制备。

1.2 主要试剂及仪器 甲醇（批号：126273）购自美国Fisher公司；Triton X-100（批号：100M01281V）购自美国Sigma公司；苯酚（批号：20160725）购自天津市灏洋生物制品科技有限责任公司；……