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核苷磷酸化酶酶活力检测方法的建立

2021-05-19唐艳吴涛王成孟月

中国调味品 2021年5期

唐艳,吴涛,2*,王成,孟月

(1.通辽梅花生物科技有限公司,内蒙古 通辽 028024;2.廊坊梅花生物技术开发有限公司, 河北 廊坊 065001)

肌苷(inosine),又名次黄苷、次黄嘌呤核苷,是由次黄嘌呤与核糖结合而成的核苷类物质。生产方法有两种;一种是以枯草芽孢杆菌发酵法制备[1],另一种是以腺嘌呤及硫胺素双重营养缺陷型的变异芽孢杆菌株,发酵制备得到肌苷[2-3]。肌苷能参与体内物质代谢和能量代谢,具有良好的药用功效[4-5],可治疗视网膜炎、视神经萎缩、抑郁症[6]、糖尿病[7],可保肝、护肝,也可抢救肝昏迷[8]。肌苷酸由化学合成、酶法合成[9]、发酵法制得[10],具有独特的增鲜风味[11-13],能有效地增强口感和食欲。

核苷磷酸化酶在最适宜的条件下[14-15]具有与肌苷、鸟苷共同作用的能力,生成肌苷酸二钠、鸟苷酸二钠、呈味核苷酸二钠,通过高效液相色谱方法测定其含量[16-17]。核苷酸常用作食品添加剂和医药中间体,其中,嘌呤核苷[18]如肌苷和鸟苷,可通过发酵及核苷的磷酸化法大规模地生产核苷酸。目前,主要有两种磷酸化方法[19-20];一种是化学磷酸化法,使用磷酸酰氯(POCl3);另一种是酶磷酸化法,使用大肠杆菌的肌苷激酶。化学磷酸化的过程相对复杂,需要两个反应器,用于发酵和化学反应;酶的磷酸化过程比较简单,在同一个反应器中进行发酵。酶的磷酸化法替代化学磷酸化法生产核苷酸是目前的趋势,污染小,成本低,可营造健康的生产作业环境。因此,核苷磷酸化酶产品质量的判定十分重要,是生产工序的判定依据,酶活力检测具有十分重要的意义,本文详细地介绍了酶活力检测的方法。……

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