罗嘉慧卢秋翰李国萃张京京丛 喆魏 强

(北京协和医学院比较医学中心,中国医学科学院医学实验动物研究所,国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室,国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室,新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室,北京 100021)

CD8+T 细胞在多种病毒感染性疾病的免疫控制中起着至关重要的作用,一般认为对病毒复制有更好控制能力的患者拥有更强的特异性T 细胞应答,其CD8+T 细胞也具有更高的细胞因子生产能力[1-4],但仍需要更多的相关研究来支持。 CD8+T细胞活性测定对细胞功能评定直接相关。 由于实验条件限定,通常情况下细胞及组织常冷冻(-80℃、液氮等)保存[5-6],冻存会对细胞的部分理化状态造成影响[7],但在多大程度上影响细胞活性,缺乏实验依据。 因此,通过实际样本测定,了解冻存对其活性的影响,有重要的实际应用意义,也为今后的细胞内细胞因子染色实验提供借鉴。

1 材料和方法

1.1 实验动物

9 只SPF 级中国恒河猴,4 只雌性,5 只雄性,年龄为3～6 岁,体重约4 ～5 kg,均购自北京协尔鑫生物资源研究所[SCXK(京)2015-0011]。 实验前通过免疫荧光法筛查,排除猴疱疹病毒,猴逆转录D型病毒,猴免疫缺陷病毒及猴T 淋巴细胞性I 型病毒。 实验动物的饲养及实验操作在中国医学科学院医学实验动物研究所生物安全三级实验室进行[SYXK(京)2017-0027],实验进程遵循3R 原则。本实验使用的实验动物程序通过了中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物使用与管理委员会(IACUC)的批准(XJ19006)。……