陈思攀，杨耀博，焦 阳，颜昭勇

(陕西省人民医院介入放射科,陕西 西安 710068)

肝癌是我国一种常见的、高发的恶性肿瘤，我国每年新增肝癌患者占全球新增的55%，对该病的诊治形势依然十分严峻[1]。目前首选治疗为手术切除，但大部分肝癌患者伴有肝硬化，使手术切除量有一定的限制[2]。近年来，经导管动脉内栓塞(Transcatheter arterial embolization，TAE)介入治疗逐渐成为主要方法之一，但术后远期疗效仍不理想，复发及转移率高[3]。基因治疗领域的重要发现之一是小干扰核糖核酸(Smallinterfering ribonucleic acid,siRNA)，为肝癌的靶向治疗提供了新的治疗手段，为不能手术患者的提供了新的途径[4]。siRNA能特异地结合细胞内靶mRNA形成沉默复合体，进而阻断或减少下游蛋白质的合成，此为RNA干扰现象。siRNA诱导的基因沉默特异性高、操作简单、周期短，应用前景广阔[5]。经导管动脉内栓塞能加重缺氧微环境，升高肝癌细胞缺氧诱导因子-1(Hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)的基因表达，继而引起血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)的异常高表达，刺激肿瘤细胞的增殖[6-7]。本研究通过建立VX2肝癌兔模型，考察TAE联合siRNA干扰HIF-1α对肝癌兔的疗效及对HIF-1α、VEGF表达的影响。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 仪器与试剂：HIF-1α多克隆抗体购自美国Cell Signaling Technology公司，HIF-1α shRNA购自美国Santa Cruz公司，大规模质粒抽提试剂盒购自Qiagen公司，质粒小量中提试剂盒购自北京天根生化，注射用青霉素钠购自华北制药，血管鞘、Cobra导管等购自Terumo；聚乙烯醇(PVA)微粒购自Cook公司，光学显微镜(OlympusBX53)购自Olympus，Philips Brilliance 64层螺旋CT购自荷兰飞利浦公司，自动生化分析仪(BA-200FR)购自日本东芝公司。

1.1.2 实验动物：以20只2～3个月龄的雄性新西兰大白兔为研究对象，体重2.0～2.5 kg，由杭州余杭科联兔业有限公司提供，许可证号SCXK(浙)2017-0004，合格证号1805160014。……