张莉萍，牛 春，石彦鹏， 张 萍

(宁夏泰瑞制药股份有限公司，银川 750002)

庆大霉素(Gentamicin，GM)主要是由绛红小单孢菌(MicromonosporaPurpurea)和棘孢小单孢菌(M.echinospora)发酵产生的一种氨基糖苷类广谱抗生素，对多数革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌中的金黄色葡萄球菌均有较强的抗菌作用，是临床上广泛使用的抑菌抗生素之一[1]。

庆大霉素因自身没有紫外吸收特性，其效价检测一直以来是国内研究热点。主要检测方法有微生物检测法、旋光法和衍生法，目前这些检测方法通常只用于较纯的庆大霉素制剂浓度分析。在发酵生产过程中，由于发酵液中的成分比较复杂，且对发酵液效价检测一般要求需要多次重复的快速检测，微生物检测法操作步骤繁琐复杂、且耗时长，本实验利用庆大霉素的旋光性以及庆大霉素氨基糖苷上的氨基与特定化合物发生衍生反应原理，分别采用旋光法、紫外分光光度衍生法和高效液相色谱衍生法测定降红小单孢菌发酵生产的庆大霉素发酵液效价，通过比较各检测方法测定的效价含量筛选出最适合庆大霉素发酵液的效价检测方法。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 出发菌株 绛红小单孢菌(Micromonospora purpurea)购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，编号4.5706。

1.1.2 培养基及培养条件 斜面培养基(%)及培养条件：可溶性淀粉1.0%，NaCl20.05%，KNO30.1%，CaCO30.1%，K2HPO40.03%，麸皮2.0%，MgSO40.05%，琼脂2.0%，天冬素0.002%，pH7.40～7.60，37 ℃培养7 d[2]。

种子培养基(%)及培养条件：葡萄糖0.1%，玉米淀粉1.0%，玉米粉1.5%，蛋白胨0.2%，黄豆饼粉1.0%，CaCO30.6%，COCl21 ug/mL，KNO30.05%，植物油0.2%，pH自然，34 ℃培养24 h[3]。

发酵培养基(%)及培养条件：葡萄糖0.5%、玉米淀粉5.0%、玉米粉1.0%、蛋……