侯力丹，王 嘉，刘 丹，陈晓春，翟天舒，杨承槐，杨汉春，毛娅卿*，李俊平*

(1.中国兽医药品监察所，北京 100081；2.中国农业大学动物医学院，北京 100193)

禽腺病毒(Fowl Adenovirus，FAdV)是鸡、鸭等禽体内常见的传染性病毒之一。自2015年6月以来，我国山东、河南、河北等省份的部分地区鸡群中发生了以心包积液和肝脏肿大为特征的传染病。经过大量的研究，确定该病是由血清4型的I群FAdV所引起[1]。在我国五个省市的家禽养殖场，发现至少有三种FAdV (FAdV-C、FAdV-D、FAdV-E)的流行，并且在包涵体肝炎(Inclusion body hepatitis，IBH)和心包积水综合征(Hepatitis-hydropericardium syndrome, HPS)病例中的混合感染很常见[2-4]。Chen等[5]在2015-2018年收集我国15个省市共计280份病料，发现155份存在有腺病毒感染，其中FAdV-4型占比79.4%，FAdV-8a型占比13.5%，FAdV-8b型占比3.9%。

近年来，为了防控禽腺病毒病，我国通过不同的方式开展了疫苗研制工作，而在疫苗研制过程中标准化且毒力稳定的检验强毒株是评价疫苗的重要标准物质。本研究于2016年从山东地区发生心包积液的疑似腺病毒感染鸡群中采集病料进行了病毒分离鉴定，获得1株血清4型FAdV GY株，并对其进行了纯化、鉴定、种子批的建立和致病力的测定，以期通过研制提供可靠的检验用强毒株，为疫苗的研制和评价奠定物质基础。

1 材料与方法

1.1 病料来源及样本处理 2016年，山东某鸡场疑似发生禽腺病毒感染，发病鸡剖检表现为严重的心包积液，呈透明的淡黄色或浅褐色，肝脏肿大、变脆、出血或坏死，采集其肝、脾等组织。将从剖检见肝脏病变坏死病鸡中采集的肝脏组织3～4 g，按肝脏组织(g)∶PBS(mL)为1∶5的比例加入无菌PBS，放入匀浆器中，经-80 ℃反复冻融3次，4 ℃ 12000 r/min离心5 min，收取上清，用0.22 μm的细菌滤器过滤，分装于1.5 mL离心管中备用。……