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丫蕊花皂苷P 的抗白色念珠菌活性研究

2021-05-13司马全曹林森徐贵丽

西南国防医药 2021年2期
关键词:小鼠

司马全,王 平,曹林森,徐贵丽

白色念珠菌(Candida albicans,CA)是一种普遍存在的条件性致病菌,也叫白假丝酵母。 白色念珠菌也是目前最主要发生侵袭性念珠菌感染的病原。 丫蕊花属(Ypsilandra Franch.)为百合科(Liliaceae Juss.)多年生草本植物,全草具有清热解毒等功效。甾体皂苷作为丫蕊花的主要活性成分,在近几年大量研究中发现其具有抗肿瘤、抗菌、止血等多种生理活性。本试验研究丫蕊花皂苷P 的抗白色念珠菌效果。

1 材料与方法

1.1 药物与试剂 丫蕊花皂苷P[1](ypsilandroside P,纯度≥97%),由解放军920 医院药学部临床微生物实验室前期制备,丫蕊花皂苷P 化学结构式见图1;氟康唑氯化钠注射液(fluconazole,FLC),辉瑞制药有限公司,批号:A490705; 注射用环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX),百特国际有限公司,批号:6C105A。

图1 丫蕊花皂苷P 结构式

1.2 供试菌种 实验菌株标准菌株:CA(ATCCY0109和ATCCSC5314)采购自中国药品生物制品鉴定所。分离耐药菌株:CA 耐药菌(CA632、CA592、CA953、CA819、CA152、CA100、CA649、CA956), 均由第 920医院药学部临床微生物实验室提供。

1.3 实验动物 无特定病原体(SPF)级巴比赛(BALB/c)小鼠,雌性,6~9 w,18~22 g[昆明医科大学实验动物中心,实验动物生产许可证:SYXK(滇)K2015-0002]。 于实验室适应性饲养1 w 后再进行实验。

1.4 实验方法

1.4.1 药液制备 制备药液: 将丫蕊花皂苷P 以含10%二甲基亚砜的生理盐水作为溶剂,配置成浓度为4.096 mg/ml 的药液。 阳性药液的制备:将氟康唑用生理盐水配置为16 μg/ml 的药液以备用。

1.4.2 丫蕊花皂苷P 的最小抑菌浓度(MIC)的测定 参考CLSI 2017 版指南(CLSI:M07-A10, 2017)中微量液体培养基倍比稀释方法,测定丫蕊花皂苷P 对不同的白色念珠菌细胞的MIC 值。 重复3 次后数据取平均值。

1.4.3 最低杀菌浓度 (MBC) 的测定 确定MIC后,用接种环分别蘸取每个菌种MIC 值前3~5 个孔的培养液,转接种于相应的琼脂平板上,置于恒温培养箱中35 ℃培养24 h。……

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