闫楚凡 韩笑 张劲松

中国医科大学附属第四医院眼科，沈阳 110059

糖皮质激素性白内障多见于全身或局部长期使用糖皮质激素者，其发病机制尚未完全阐明。许多生物学过程被证明与糖皮质激素性白内障的发生相关，如细胞分化异常和糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor，GR)的激活等[1-3]；糖皮质激素还导致晶状体中E钙黏附蛋白和N钙黏附蛋白的表达量下降，而细胞黏附在晶状体上皮细胞(lens epithelial cells，LECs)的正常分化和迁移中有重要作用[4]。微小RNA(microRNA，miRNA)是一种长度为18～22个核苷酸的非编码RNA，与基因的3’端非翻译区结合，通过抑制基因的转录来影响蛋白的表达。既往研究发现，miR-29a可以靶向抑制GR mRNA的表达，同时其本身的表达量又依赖于GR的激活，形成一个负反馈回路，这个特点在糖皮质激素治疗过程中有助于减缓GR水平的逐渐降低[5]，这为糖皮质激素性白内障的治疗提供了新的思路。目前关于miRNA与糖皮质激素性白内障的研究尚未见报道。本研究基于生物信息学方法分析经地塞米松处理的LECs中差异基因的表达及其相关的生物学功能，筛选并验证hub基因的表达，预测与其最有可能相关的miRNA，以期为白内障的治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞来源 人LECs细胞株HLE-B3细胞购自美国ATCC公司。

1.1.2主要试剂及仪器 地塞米松、Trixon X-100(北京索莱宝科技有限公司)；二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)(美国Sigma公司)；MEM培养液、胰蛋白酶、磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS)(江苏凯基生物技术股份有限公司)；胎牛血清(澳洲AusGeneX公司)；青链霉素混合液(美国HyClone公司)；RNA iso Plus、实时荧光定量PCR试剂盒(日本TaKaRa公司)；……