郑 乐

中国医科大学肿瘤医院(辽宁省肿瘤医院) 妇科，辽宁 沈阳 110042

卵巢恶性肿瘤在女性生殖器官恶性肿瘤中死亡率居第1位，病因尚未明确。恶性肿瘤的发生和发展通常是一个多因素、多阶段的过程，包括原癌基因激活、肿瘤抑制基因失活等。有研究表明，Ras基因为原癌基因，其激活突变参与多种肿瘤的发生和发展过程，如膀胱尿路上皮癌[1]、胃癌[2]、肺癌[3]、肝癌[4]等。Ras效应因子-1(Ras interactor-1，RIN1)是人体内的一个特征性Ras效应因子[5]，能够直接激活ABL络氨酸激酶及RAB5家族的GTP酶[6]，还可参与表皮生长因子受体的内吞作用[7]。本研究旨在探讨RIN1在上皮性卵巢肿瘤中的表达水平及意义。现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集辽宁省肿瘤医院自2017年1月至2018年12月收治的150例接受手术治疗患者的新鲜卵巢组织标本。150例患者中，正常卵巢30例(A组)，上皮性卵巢良性肿瘤30例(B组)，上皮性卵巢交界性肿瘤30例(C组)，上皮性卵巢恶性肿瘤60例(D组)。D组中，病理分期Ⅰ+Ⅱ期30例，Ⅲ+Ⅳ期30例；分化程度高-中分化30例，低分化30例。患者及其家属均签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 仪器及试剂 RIN1、β-actin兔抗人多克隆抗体，RIN1、β-actin引物，实时定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)试剂盒，PVDF膜(北京博奥森公司)；SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(南京凯基生公司)；电泳仪，实时定量PCR仪等。

1.3 Western Blot法检测RIN1蛋白表达水平 组织块称质量，提取组织中核蛋白并测定其含量，电泳，转膜，封闭，加一抗，孵育PVDF膜，4℃过夜，加二抗，室温振荡孵育，Western Blot试剂盒显色，凝胶成像系统分析条带灰度值并进行比较。

1.4 PCR法检测RIN1 mRNA表达水平 提取标本总RNA，采用Takata等方法进行PCR检测。……