任 超 王超越 刘贤勇 索 勋*

(1.中国农业大学 动物医学院，北京 100193； 2.天津农学院 动物科学与动物医学学院/天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室，天津 300384)

敲除弓形虫的氨甲酰基磷酸合成酶II(Carbamoyl phosphate synthetase II，CPSII)基因，阻断嘧啶从头合成途径，构建cps1-1虫株，能够激发宿主产生良好的免疫保护力，成为潜在的弓形虫减毒活疫苗[1]，但是由于cps1-1虫株存在嘧啶补救途径，能够在机体内缓慢增殖，虫体的毒力会有返强的机会，临床应用会存在极大的风险。为此，2010年Bzik研究团队将弓形虫的乳清酸核苷-5’-单磷酸脱羧酶(Orotidine-5’-monophosphate decarboxylase，OMPDC)和尿嘧啶核苷磷酸化酶(Uridine phosphorylase，UP)基因进行双敲除，不仅阻断了嘧啶从头合成途径，而且通过体外调节尿嘧啶的浓度，能够控制嘧啶补救途径，获得非复制型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫(Nonreplicating toxoplasma uracil auxotrophs，NRTUAs)[2-3]。

NRTUAs具有独特的表型，在哺乳动物体内不能增殖，只能入侵机体细胞，而NRTUAs只有在体外添加尿嘧啶的培养基中才能正常裂殖生殖，否则只能入侵细胞，不能增殖，进而降低弓形虫的毒力和致病性，为临床应用提供安全保障[3]。

研究发现，NRTUAs能够调节宿主的免疫系统，激发宿主产生针对弓形虫的细胞免疫应答，并且免疫虫体经过5 d左右就能被机体的免疫系统清除[4-5]。与细菌和病毒疫苗载体相比，NRTUAs首次免疫1万个虫体就可以激发宿主产生保护性免疫应答，对抗野生型弓形虫的再感染[6-8]，说明NRTUAs可作为潜在的弓形虫候选疫苗株，未来有希望应用于家畜养殖业。虽然NRTUAs在小鼠体内可被清除，但如果大剂量免疫NRTUAs，宿主细胞是否会将所有的虫体清除？……