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下调HOX转录反义RNA对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、周期及侵袭能力的影响

2021-05-10叶惠荣张玉娟曹茵王西跃吴丽华陈桂林陈丽娟袁惠玲

安徽医药 2021年5期

叶惠荣,张玉娟,曹茵,王西跃,吴丽华,陈桂林,陈丽娟,袁惠玲

三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TN‐BC)病人雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)表达均为阴性,约占乳腺癌的17%。TN‐BC因缺少PR、ER、HER2的表达,不能接受分泌治疗和抗HER2治疗的手段,目前临床上主要依赖化疗,但其乳腺癌细胞具有强转移和侵袭能力,导致相对其它类型乳腺癌,TNBC整体预后仍差。由于缺乏明确的治疗靶点,因此越来越多学者关注TNBC治疗靶点的研究。长链非编码RNA(Long Non-coding RNA,lncRNA)长度一般为200个核苷酸序列,不编码蛋白质,在X染色体灭活、染色质重塑、转录调节、细胞周期调控、MicroRNA活性、表观基因调节等生物过程均发挥重要作用。lncRNA HOX转录反义RNA(HOX Transcript Antisense RNA,HO‐TAIR)能够通过反式作用调节基因的表达。研究发现,HOTAIR在TNBC组织中表达水平升高,与TNBC的临床病理分期相关。但HOTAIR对TNBC细胞调控机制尚不清楚,本研究自2019年2—7月以TNBC细胞MDA-MB-231为模型,探究下调HO‐TAIR表达水平对MDA-MB-231细胞增殖、周期及侵袭能力的影响。

1 材料与方法

1.1 试剂和仪器 RPMI 1640培养基(货号:C11875500BT)、胎牛血清(FBS)(货号:10091-148)均购自美国GIBCO公司;转染试剂Lipofectamine 2000(货号11668019)购自武汉科昊佳生物科技有限公司;阴性对照si-Control、si-HOTAIR由上海吉玛公司合成;兔抗人c-myc(货号BS94081)、兔抗人Ki-67(货号BS90768)、兔抗人PCNA(货号BS6438)、兔抗人MMP-9(货号BS6893)、兔抗人MMP-2(货号BS72289)、兔抗人内参β-Actin(货号:AP0060)均购自美国Bioworld公司;羊抗兔二抗(货号31466)购自美国Pierce公司;RNA提取试剂Trizol(货号15596026)购自英潍捷基(上海)贸易有限公司;PrimeScript逆转录-PCR试剂盒(货号DRR042A)购自南京赛鸿瑞生物科技有限公司;FC 500系列流式细胞仪购自美国贝克曼库尔特有限公司;Multiskan FC酶标仪购自美国赛默飞世尔科技公司。……

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