宋淑范，王迪，陈德才

沈阳市第四人民医院，沈阳110031

肺癌是临床上最常见的恶性肿瘤，其发病率和病死率均位居肿瘤性疾病的首位［1］。目前，肺癌的治疗效果仍不甚满意，其5 年生存率低于20%；因此研究肺癌的发病机制对于制定肺癌预防策略，探究新的治疗方法具有重要意义［2］。长链非编码RNA（lncRNA）是一类长度超过200 nt 的内源性非编码的RNA 分子，它可以通过改变染色体构象、改变基因转录、基因翻译等起到调控基因表达的作用［3］。转移抑制性长链非编码RNA（lncRNA LIMT）是一种定位于12 号染色体的lncRNA，具有7 个外显子序列［4］。已有研究显示，在乳腺癌、肝癌中存在lncRNA LIMT 的低表达，其水平与患者预后相关，但在肺癌中的作用及机制仍未完全明确［5-6］。本研究探讨lncRNA LIMT 对肺癌细胞增殖及凋亡的影响，旨在为肺癌治疗提供新的研究思路。

1 材料与方法

1.1 材料 RPMI1640 培养基，购自Gibco 公司；Liofectamine2000，购自Invitrogen 公司；lncRNA LIMT过表达质粒pEGFP-C1-LIMT、空质粒pEGFP-C1-NC、敲减质粒siRNA-LIMT 及其siRNA-NC，均购自于广州市锐博生物科技有限公司；CCK-8 细胞增殖实验试剂盒，购自于北京全式金生物有限公司；Annexin V-FITC/PI 双染凋亡试剂盒，购自于凯基生物有限公司；表皮生长因子受体（EGFR）蛋白一抗、磷酸化EGFR（p-EGFR）蛋白一抗、细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）蛋白一抗、磷酸化ERK（p-ERK），购自于武汉三鹰公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 取冻存的人肺癌A549 细胞，进行细胞复苏，复苏后重悬至含10%胎牛血清的RPIM1640培养基中，并在37 ℃、5%CO2、饱和湿度的条件下进行培养。在显微镜下观察A549细胞形态，并与说明书中的形态进行对比；当A549细胞融合度为95%时进行细胞传代，并取二代细胞进行试验。……