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抑制miR-152 对低氧诱导子痫前期滋养细胞增殖凋亡侵袭能力的影响及机制

2021-05-08徐曼安泓润郝媛媛

山东医药 2021年13期
关键词:检测模型

徐曼,安泓润,郝媛媛

河北中石油中心医院,河北廊坊065000

子痫前期(PE)属于妊娠期高血压疾病,是一种严重的产科并发症,以孕妇高血压和蛋白尿为临床特征,对孕妇和胎儿均构成严重威胁,是孕妇和胎儿死亡的主要原因之一[1-2]。目前PE 的发病机制尚不完全清楚,临床上尚缺乏有效的治疗手段。PE 的发生被认为是一个多因素的过程,包括胎盘和内皮功能障碍、螺旋动脉重构异常、滋养细胞侵袭受损和凋亡增加等[3-4]。滋养细胞功能异常已被认为是PE 发病过程中一个极其重要的因素[5]。近年来研究发现,PE 患者的胎盘中存在着数百差异表达的微小RNA(miRNAs),这些异常表达的miRNA 可能通过影响滋养细胞的功能参与PE 的发生[6-7]。miR-152是近年来发现的miRNA 家族重要成员之一,miR-152在PE大鼠胎盘组织[8]和PE患者血清[9]中均明显增高,但具体作用机制尚不明确。2020 年7 月—2020年9月,我们通过低氧诱导建立PE 滋养细胞模型[10]探讨抑制miR-152 对PE 细胞模型增殖、凋亡及侵袭功能的影响及可能的作用机制,为PE的靶向治疗提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 主要材料 TRIzol 试剂(美国Invitrogen 公司);LipofectamineTM2000(美国Invitrogen 公司);逆转录试剂盒、qRT-PCR 荧光定量检测试剂盒(北京天根生物公司);miR-152 抑制物miR-152 inhibitor和抑制物阴性对照NC-inhibitor(上海吉玛制药公司);CCK-8 试剂盒(上海碧云天生物公司);Annexin V-FITC 凋亡检测试剂盒(南京凯基生物公司);Transwell 小室(美国Corning 公司);基质胶(美国BD 公司);一抗E-Cadherin、N-Cadherin、GAPDH(美国Santa Cruz 公司);HRP 标记的二抗(武汉博士德生物公司)。

1.2 PE 细胞模型建立及细胞分组 人绒毛膜滋养细胞HTR8/Svneo 购自美国模式菌种收集中心(ATCC),应用RPMI1640 培养基(含10%胎牛血清)置入37 ℃、5%CO2、相对湿度为98%的条件下培养。……

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