林放 周谋 单桂秋 李艳辉 李文丹

富血小板血浆（platelet-rich plasma，PRP）是全血经离心后得到的一种血小板浓缩物，其中含丰富的生长因子，在促进创面愈合和抑菌抗炎中发挥着重要的作用。由于PRP的保存时间短，受环境因素影响容易被激活或污染，降低了其应用价值。

对PRP进行冻干，能使PRP在常温条件下保存，所占空间小，还便于运输。冻干PRP一般用贫血小板血浆（platelet-poor plasma，PPP）进行复水化[1-3]，但使用前需要分离制备PPP，不仅操作繁琐，对制备环境要求高，还有患血液传染病的风险。为了让冻干PRP复水化的步骤变得更简便、安全，本实验研究了不同成分的复水液，并对复水化后的冻干PRP活化和释放生长因子效果进行比较。现将研究结果报告如下。

材料与方法

1 试剂和仪器

1.1 试剂：TGF-β1 ELISA试剂盒（RayBio，批号0615180188）、VEGF-A ELISA试剂盒（RayBio，批号0504180196）、PDGF-BB ELISA试剂盒（RayBio，批号0615180180）、bFGF ELISA试剂盒（RayBio，批号0608180107）、P-Selectin（RayBio，批号1026180217）、CD63（RayBio，批号1214182471）、生理盐水（医院自制，批号18041122）、PBS缓冲液（Thermo Fisher Scientific，批号8118177）、血细胞分析仪用溶血剂（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，批号2017122401）、血细胞分析用稀释液（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，批号2018033102）等。

1.2 仪器：酶标仪（赛默飞世尔（上海）仪器有限公司，型号Multiskan Mk3）、血细胞分析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，型号BC-3000 plue）、超纯水机（广州誉维生物科技仪器有限公司，型号Unique-S）、真空冷冻干燥机（德国Christ公司，型号Alpha1-4lsc Plus）等。

1.3 富血小板血浆来源：来自2018年8月在南部战区总医院血液中心献血的健康无偿献血者，献血前3日未服用阿司匹林或阿司匹林类药物，并进行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP等输血相关性传染病检测。用ACD五联血小板采集袋采集8人份O型全血（400 mL），汇集成1份血小板，6 h内采用白膜法制备浓缩血小板，并调节汇集血小板计数至800×109/L，（22±2）℃振荡摇床过夜，使其解聚。……