张甜甜，项楚涵，夏 勇△，马礼坤，张步春，△

（1徐州医科大学附属医院心内科，江苏徐州 221000；2中国科学技术大学附属第一医院心内科，安徽合肥 230001）

动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病，巨噬细胞在其发病的各个阶段发挥十分关键的作用。巨噬细胞按照其表型和分泌的细胞因子可分为两大类，即M1 型巨噬细胞（经典活化型，促进动脉粥样硬化的进展）和M2型巨噬细胞（替代活化型，延缓动脉粥样硬化的发展进程）［1］。尽管学术界已经认识到巨噬细胞极化状态与动脉粥样硬化的紧密关系，但其调控机制一直不清楚，其原因是巨噬细胞极化的信号调控是一个复杂的网络体系。虽然既往已有研究显示脂质代谢物参与调控巨噬细胞亚型的功能［2-4］，然而，在这些研究中所使用的细胞系和细胞处理方式不同，所得的实验结果也不完全一致。因此，有必要运用脂质组学技术进一步筛选M1 型巨噬细胞极化过程中特异性脂质含量变化。

本研究应用非靶向脂质组学技术研究体外环境下脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）/干扰素γ（inter⁃feron-γ，IFN-γ）作用于RAW264.7 巨噬细胞后，其分泌的脂质代谢物含量的变化。通过差异表达脂质分子代谢通路分析，筛选与M1型巨噬细胞极化相关的关键信号通路，为动脉粥样硬化发病机制提供新的研究思路和理论依据。

材料和方法

1 主要试剂

DMEM 高糖培养基（HyClone）；胎牛血清（WISENT）；LPS（Sigma）；IFN-γ（Peprotech）；兔抗CD86 抗体（Biolegend）；兔抗诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）抗体和兔抗GAPDH 抗体（Affinity）；乙腈、异丙醇和甲醇（Thermo Fisher）。

2 细胞培养

小鼠巨噬细胞RAW264.7 购自中国科学院上海细胞库。……