李 雯,赵 丹，万自芳，张湘燕△

(1.贵州医科大学,贵阳 550004；2.贵州省人民医院呼吸与危重症医学科/贵州省人民医院肺脏免疫性疾病重点实验室，贵阳 550002)

慢性间歇性低氧(chronic intermittent hypoxia，CIH)是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome，OSAHS)特有的特殊低氧模式[1]。OSAHS是临床常见的综合征,目前普遍认为其是一种全身性疾病，可致多器官损害,是高血压的致病因素，也是中风、缺血性心肌病、心力衰竭、心律失常、糖尿病等疾病的独立危险因素[2]。肠道微生物作为人或动物的“共生体”，辅助宿主进行营养吸收和能量代谢[3]。正常生理状态下肠黏膜处于高灌注状态，对缺血、缺氧十分敏感，机体整体或肠道缺血、缺氧的状态会直接损伤肠黏膜，进一步影响肠道微生物的定殖[4]。CIH所致睡眠剥夺可引起多种应激反应，目前认为肠道菌群移位所致的菌血症和毒素血症是应激反应恶性发展的主要原因，睡眠剥夺可影响大鼠肠道菌群，促进有害的产气荚膜梭菌增殖[5]。本研究采用高通量测序研究不同程度CIH条件下大鼠肠道微生物菌群的改变。

1 材料与方法

1.1 建模及分组

选取健康清洁级雄性Sprague Dawley大鼠30只分为CIH组[A组(O28% 4周)、B组(O28% 8周)]和对照组，每组10只。CIH组大鼠循环给予氮气和氧气充入培养舱，每次循环2 min，维持氧浓度在8% 30 s，恢复氧浓度21% 60 s，每天造模8 h；A组造模4周，B组造模8周。对照组放置于常氧环境饲养8周。留取大鼠粪便样品，用75%乙醇消毒大鼠肛周皮肤，刺激其排便，使用灭菌镊子从大鼠肛门部取出粪便保存于无菌EP管，随后迅速投入液氮，-80 ℃保存至备用。……