侯伟伟， 江 涟， 李 冬

（同济大学附属同济医院检验科，上海 200065）

血流感染（bloodstream infection，BSI）是临床常见的严重的全身感染性疾病，死亡率较高[1-2]。血培养是BSI诊断的金标准，快速、准确地确定病原菌信息，及时对症用药是临床治疗BSI的关键。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS）彻底打破了传统微生物鉴定的模式，使微生物的快速鉴定成为一种可能。本研究采用质谱联合分离胶离心方法，对报阳血培养样本进行前处理后的快速质谱检测[3]，精简操作步骤，缩短临床获取血培养结果的时间，助力临床快速诊疗。

1 材料和方法

1.1 样本收集

收集同济大学附属同济医院血培养报阳样本682例，同一患者的需氧血培养瓶和厌氧血培养瓶均纳入本次研究。质控菌株及质谱校准参考菌株大肠埃希菌（ATCC 8739）购自上海市临床检验中心。

1.2 主要仪器与试剂

质谱仪、Vitek 2 Compact自动化鉴定药敏仪（法国生物梅里埃公司）；Bactec FX全自动血培养仪（美国BD公司），血琼脂平板（美国Thermo公司）；甲酸、乙腈（美国Sigma Aldrich公司）；Bactec血培养树脂需氧瓶、含溶血素厌氧瓶、10 mL一次性无菌注射器、无菌Eppendorf管及分离胶采血管（美国BD公司）；基因组DNA提取试剂盒及聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）相关试剂[生工生物工程（上海）有限公司]。

1.3 方法

1.3.1 常规染色镜检和转种培养鉴定 将血培养瓶颠倒混匀，用无菌注射器抽取培养液涂片，行革兰染色镜检。若镜下未见细菌，结合培养结果等排除假阳性可能。用无菌注射器抽取培养液接种于血琼脂平板/厌氧血琼脂平板，孵育18～24 h后挑取菌落，进行质谱鉴定；……