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O、A、Asia 1型口蹄疫病毒胶体金定量检测免疫层析方法的建立

2021-04-27孙燕燕陈夏辉李峰松包艳芳

畜牧兽医学报 2021年4期
关键词:检测

李 昕,孙燕燕,林 密,陈夏辉,李峰松,包艳芳,杨 光,蒋 韬

(中国农业科学院兰州兽医研究所,兰州 730046)

口蹄疫(foot-and-mouth disease, FMD)是一种高度接触性传染病,在全世界广泛流行,严重影响了畜牧业发展,造成了巨大的经济损失[1-2]。口蹄疫病毒(FMDV)有O、A、C、SAT1、SAT2、SAT3、Asia1型7种血清型,且各血清型之间无交叉保护性,因此,对不同血清型的快速鉴别诊断可以有效预防和控制口蹄疫[3-5]。同时,在口蹄疫长期流行的地区,确定流行区血清型对于接种疫苗的选择以及追踪传染源至关重要[6]。接种口蹄疫疫苗是预防口蹄疫暴发的最有效措施。近年来,在中国流行的口蹄疫病毒为O、A血清型,针对这一流行情况,在疾病的流行地区主要免疫的为单一血清型的灭活疫苗或O型、A型双价灭活疫苗。为了保证动物得到有效的免疫接种,在生产中应该严格控制疫苗质量[7-9]。目前,世界动物卫生组织(OIE)规定的生产毒种和疫苗的效力检验是通过在动物体内进行攻毒保护试验,计算疫苗的PD50完成,此方法是最为可靠评价疫苗效力的方法,有较高的生物安全要求[10-11]。但对于不同批次,不同阶段生产细胞毒的有效抗原含量评价,使用此方法会消耗大量的人力、物力和时间,检验成本巨大,效率低,无法满足现实生产中间产品、成品的快速检验的需求。为了解决这一问题,许多生产企业已经衍生出许多体外检测疫苗中间品和成品中有效抗原含量的方法。

蔗糖密度梯度(sucrose density gradient, SDG)法是其中比较常见的一种。它根据沉降系数将FMDV分为146S、75S、45S和12S。完整的病毒颗粒146S具有较强的免疫原性,并且是病毒颗粒中的主要免疫原,因此,在疫苗生产中将146S含量的检测作为检测疫苗效力的重要指标[12-14]。……

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