杨先富，莫兴虎，杨胜红，杨政益，彭彩丽，吴通奎，袁晓娟

(黔东南州动物疫病预防控制中心，贵州 凯里 556000)

小反刍兽疫(PPR)又称羊瘟、小反刍兽假牛瘟等，是由小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus，PPRV)引起的一种急性病毒性传染病。该病毒主要感染山羊、绵羊等小反刍动物，常呈急性发作,病死率高[1]。一旦发生羊小反刍兽疫疫情，会对养羊生产造成很大威胁。为掌握黔东南州小反刍兽疫疫苗的免疫效果，为全州小反刍兽疫的防控提供重要依据，2020年下半年笔者等在黔东南州16个县(市)的16个规模羊场采集羊血清样品，进行抗体检测，现将检测结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 山羊血清与检测试剂

山羊血清采集于黔东南州16个县(市)的16个规模羊场，共计687份。小反刍兽疫ELISA抗体检测试剂盒(批号：20200509)由深圳市康百得生物科技有限公司生产。

1.2 免疫抗体检测与结果判定

1.2.1 抗体检测

1) 洗涤液配置。用蒸馏水将洗涤液10×(2号液)按1∶10稀释为工作浓度洗涤液。

2) 样品稀释及加样。用样品稀释液(5号液)将待检血清按1∶100稀释，每个样品孔加100μL。

3) 加阴、阳性对照品。阴性对照2孔，每个孔阴性对照品(试剂盒内提供)加入100 μL；阳性对照2孔，每个孔加阳性对照品(试剂盒内提供)100 μL，盖好封板膜，37℃避光反应30 min。

4) 洗板。甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液洗涤3次，1 min/次，最后1次甩净，拍干。

5) 加酶反应。每孔加酶标结合物(1号)100 μL，盖好封板膜，37℃避光反应30 min。甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液洗涤3次，1 min/次，最后1次甩净，拍干。

6) 显色反应。按所需用量，临用前取等体积底物溶液(3号液)和显色液(4号液)充分混匀，每孔加100 μL，盖好封板膜，37℃避光反应15 min；……