王丽 王薇

(中南大学湘雅医学院附属海口医院皮肤科，海口 570208)

着色芽生菌病(chromoblastomycosis，CBM)是一种慢性皮肤和皮下组织肉芽肿性真菌病[1,2]。

该病顽固难治、复发率高，通常局限于皮肤和皮下组织，表现为慢性疣状、结节状或菜花状肉芽肿性皮肤病变。晚期可经淋巴管血管播散，致畸致残，甚至在慢性溃疡的基础上发生鳞状细胞癌，严重威胁人类身心健康[3]。

黑色素是多数病原真菌的重要毒力因子，例如白念珠菌、隐球菌、孢子丝菌、组织胞浆菌和曲霉等。其具有极强的抵御外来离子辐射、氧化条件变化、极度温度更替和pH 值改变的作用[4]。此外黑色素还担负着增强致病真菌侵袭毒力和诱生真菌耐药性的作用,导致人体免疫防御反应性降低和抗真菌药物耐药性升高[5]。目前关于F.monophora致病性研究相对缺乏。本研究通过建立不同菌株、细胞壁色素颗粒与小鼠巨噬细胞共培养体系，测定一氧化氮合酶基因、亚硝酸盐浓度、Th1、Th2细胞因子的表达，探讨黑色素是否为F.monophora重要毒力因素，是否在巨噬细胞与F.monophora免疫反应中起到相关作用。

1 材料和方法

1.1 菌种来源

实验菌株由中山大学孙逸仙纪念医院真菌室提供，分离自81岁男性患者的皮损。该菌株经形态学及ITS序列检测为F.monophora，是1株分生孢子变异株，编号为CBS122845，在SDA培养基上，转种10余次产生其白色突变株(CBS125149)。

1.2 透视电镜观察两株菌

使用无菌接种针从马铃薯斜面培养基(PDA)表面，将CBS122845，CBS125149剥离下来，放置存有PBS的试管中，用无菌玻璃吸管反复轻轻吹打菌落，制备菌悬液。……