陈海兰 刘心建

（山西焦煤运城盐化集团有限责任公司，山西运城，044000）

2020年12月，我国多地陆续报道冷链物品外包装新型冠状病毒（COVID-19）核酸检测阳性，通过冷链物品引发的新型冠状病毒肺炎疫情时有发生。为解决全国疫情防控之急需，研究低温消毒剂并确保低温消毒效果成了各消毒剂生产企业的头等大事之一。

十二烷基二甲基苄基氯化铵（1227），别名苯扎氯氨、洁而灭等，是一种广谱、高效的阳离子杀菌剂，广泛应用于医疗、纺织印染和水处理行业[1]。目前，有关1227的杀菌性能研究大都在常温条件下进行[2-3]，事实上低温状态下消毒剂的消毒效果通常具有很大的不确定性[4]。为了解1227在低温条件下的杀菌效果，笔者在-18℃条件下进行了实验观察，以期为从事低温消毒剂开发的业内同仁提供参考。

1 实验部分

1.1 材料和仪器

1227（50%，工业品），金黄色葡萄球菌（ATCC6538，第5代）和大肠杆菌（8099，第4代），牛血清白蛋白，胰蛋白胨生理盐水溶液（TPS）稀释液，中和剂为D/E中和肉汤，营养琼脂培养基，平纹棉布片（10 mm×10 mm）。

生物安全柜、培养箱、恒温器、电冰箱以及其他微生物实验必备器材等。

1.2 实验方法

（1）将1227用乙二醇和乙醇稀释成浓度0.5%的溶液，然后放入-18℃冰箱中备用。

（2）将实验菌株24 h营养琼脂培养物，用TPS洗下菌苔，制成菌悬液。用3.0%牛血清白蛋白稀释，使菌液的浓度约为5×108cfu/mL。取10 μL均匀涂抹于灭菌棉布片上，（36±1）℃恒温培养箱中干燥后，放入-18℃冰箱中备用。

（3）采用载体浸泡定量杀菌实验[5]。在无菌平皿中加入5.0 mL溶液（1），加入菌片（2）并使之浸没于液体中。在-18℃条件下作用至设定时间（15、30、45 min）后，取出菌片移入含5.0 mL中和剂的试管中。……