左新慧， 李君， 韩祥祯， 刘小元， 何惠宇，2

1.新疆医科大学第一附属医院（附属口腔医院）口腔修复科，新疆维吾尔自治区 乌鲁木齐（830054）；

2.新疆维吾尔自治区口腔医学研究所，新疆维吾尔自治区 乌鲁木齐（830011）

组织工程骨为解决骨组织的缺损和修复提供了新的方向，其中种子细胞、细胞因子与支架材料是构成组织工程骨的三大要素。骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）具有多向分化和自我更新的功能，可作为理想的种子细胞［1⁃2］，成熟的基因治疗技术也为细胞构建更加稳定的生长环境，延缓其老化过程，促使细胞增殖能力和分化能力等提供了可靠的方法［3］。低氧诱导因子⁃1α（hypoxia⁃inducible factor⁃1α，HIF⁃1α）通过调控其编码相对应的生长因子产物，可以直接或者间接参与血管发生的整个过程。研究发现在骨缺损修复过程中HIF⁃1α 也发挥着调控作用，其通过不同途径诱导成骨因子的生成，进而促进缺损部位血管生成［4］。利用RNA 干扰（RNAi）技术使目的基因表达沉默，具有高特异性［5］。

本研究通过体外实验上调和下调BMSCs 中的HIF⁃1α 的表达，观察各组BMSCs 中的成骨和血管生成相关因子的变化，探究HIF⁃1α 对BMSCs 成骨分化和血管生成相关因子表达的影响，为HIF⁃1α在骨组织工程中的应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要材料和仪器

HIF⁃1α 过表达质粒和低表达质粒（由上海吉凯基因科技有限公司提供）；清洁级SD 大鼠，雌雄不限，体重（100 ± 10）g，由新疆医科大学动物实验中心提供，许可证号：SCXK（新）2016⁃0003。

主要试剂：MEM basic（1 ×）培养基（Gibco，美国）；胎牛血清（BI，美国）；0.25%胰蛋白酶（Hy⁃Clone，美国）；质粒提试剂盒（BIOMIGA，美国）；……