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山羊化脓隐秘杆菌溶血素抗体间接ELISA检测方法的建立、验证及应用

2021-04-23徐登峰张素辉余远迪许国洋赵扬扬付利芝沈克飞

中国生物制品学杂志 2021年4期
关键词:血清检测方法

徐登峰 ,张素辉 ,余远迪 ,许国洋 ,赵扬扬 ,付利芝 ,沈克飞

1.重庆市畜牧科学院,重庆402460;2.重庆市兽用生物制品工程技术研究中心,重庆402460

近年,三峡库区山羊体表和脏器发生脓肿现象较为普遍,一定程度上影响了该地区的养羊经济效益。山羊体表和脏器脓肿一般由多种化脓菌混合感染引起,其中对山羊危害严重的是化脓性肺炎等感染,该病在国内多地流行,化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)是其病原菌之一[1-4]。化脓隐秘杆菌是一种动物黏膜的共生菌,通常寄生于呼吸道、消化道和泌尿生殖道中,是牛羊多种动物的一种条件性致病菌,可经皮肤、黏膜破损处入侵而引起体表、组织、器官的脓肿[3-4]。

化脓隐秘杆菌感染导致山羊呼吸道疾病引起的危害正逐渐引起重视,该病常演变成慢性消耗性疾病,且为混合感染,临床诊断困难[5]。早发现是防控化脓隐秘杆菌感染的重要环节,因此简便、准确的诊断方法尤为重要。目前,检测和诊断化脓隐秘杆菌感染的方法主要有病原菌分离培养和核酸检测等[5],这些方法适用于体表感染和病危被剖检的动物,不适用于还有经济价值的脏器感染动物。间接ELISA 法可用于后者的检测和诊断,但目前尚无针对检测山羊化脓隐秘杆菌抗体的间接ELISA 法。溶血素(pyolysin,PLO)是化脓隐秘杆菌分离株分泌的唯一外毒素,是其一种重要的抗原,可作为血清学诊断用抗原[6-7]。本实验采用E.coli 表达系统表达重组溶血素(recombinant pyolysin,rPLO)的 37 ~ 281 位氨基酸,并建立化脓隐秘杆菌感染的间接ELISA 检测法,以期用于山羊化脓隐秘杆菌感染的快速诊断。……

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