王淑菁，付瑞，秦骁，刘朝阳，胡雅灵，王增，韩斌，王魁，岳秉飞

1.中国食品药品检定研究院，北京100050；2.上海生物制品研究所，上海201403；3.北京科兴生物制品有限公司，北京100085；4.华兰生物疫苗有限公司，河南新乡453000

疫苗生产过程中，不论是用胰酶进行细胞消化，还是用鸡胚传代培养，均存在外源性病毒污染的风险［1-2］。外源性病毒污染不仅影响疫苗的使用效果，且由于部分外源病毒的致病性，可能引起严重的生物安全问题［3-4］。降低潜在的外源病毒污染，保证疫苗的安全可靠是生物制品行业及管理部门的重要职责。《中国药典》三部（2015 版）中流感全病毒灭活疫苗及流感病毒裂解疫苗，均属鸡胚培养流感疫苗，规定这两种疫苗的种子批毒种需排除3 种外源性禽病毒［禽腺病毒Ⅰ型、Ⅲ型和禽白血病病毒（avian leukosis virus，ALV）］污染［5］，禽腺病毒Ⅰ型即鸡胚致死孤儿病毒（chicken embryo lethal orphan virus，CELO）、禽腺病毒Ⅲ型即减蛋综合征病毒（egg drop syndrome virus，EDS）及 ALV 本身引起禽类的传染病并不严重，但往往引起鸡群隐性感染，并能垂直感染鸡胚，将给生物制品行业带来严重危害［6］。周斌等［7］使用电镜观察及PCR 扩增，发现鸭肝炎病毒鸡胚尿囊液种毒中污染了高浓度的CELO。胡晓苗等［8］调查活毒疫苗中ALV 的污染情况，随机抽取国内外公司生产的的活毒疫苗，ALV 检出率为28.57%。《中国药典》三部（2015 版）规定的检测方法是将流感毒种中和后，在鸡胚成纤维细胞及鸡胚肝细胞上连传3 代培养，再进行血清学方法检测。现行方法检测周期长，至少需4 周；检测步骤繁琐，需制备原代鸡胚肝细胞。因此，急需建立快检方法，提高检测效率，缩短检测时间，以满足目前季节性流感疫苗批签发和应急检验的要求。……