杜健磊,王俊苹,刘 伟

1)驻马店市中心医院药学部 河南驻马店 463000 2)新乡医学院第三附属医院临床药学室 河南新乡 453003

急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)是多种病因引起的急腹症，发病机制复杂，炎症介质、胰腺腺泡细胞钙超载等均与其发病有关[1-2]。研究[3]表明中药治疗AP疗效确切，可降低病死率。黄酮类化合物主要以游离的苷元或糖结合的苷类形式存在于植物体内，黄酮苷元比结合型糖苷具有更强的抗炎、抗氧化功能[4]。银杏黄酮苷元(ginkgo flavone aglycone，GA)是银杏叶提取物中的黄酮苷通过化学修饰去除糖基后获得的新型物质，研究[5]认为GA对脑缺血和动脉粥样硬化具有较好的防治作用。GA通过NF-κB信号通路减弱心肌缺血再灌注损伤中的细胞凋亡和炎症反应[6]。双特异性磷酸酶1(dual specificity phosphatase 1，DUSP1)也称为丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶1(mitogen-activated protein kinase phosphatase 1，MKP1)。研究[7]表明沉默DUSP1可通过激活AP小鼠血清中的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)信号通路来促进促炎细胞因子的释放[8]。本实验用雨蛙素刺激大鼠胰腺腺泡AR42J细胞制备AP腺泡模型细胞[8]，观察GA对AP腺泡细胞炎症因子分泌和凋亡的影响，探讨其机制是否与DUSP1有关。

1 材料与方法

1.1细胞株与主要试剂大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J购自上海圻明生物科技有限公司；胎牛血清、RPMI 1640培养基购自上海联硕生物科技有限公司；雨蛙素购自美国Sigma公司；GA由贵州省生化中心何照范教授惠赠；LipofectamineTM2000转染试剂购自美国Invitrogen公司；ELISA试剂盒购自上海博湖生物科技有限公司；Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒购自上海科敏生物科技有限公司；RIPA蛋白裂解液、BCA试剂盒购自苏州瑞诺德生物科技有限公司；……