黄陆平 余绮旻 陈思佳 王均炉#

1 温州医科大学附属第一医院 浙江 温州 325000

2 浙江省台州医院 浙江 台州 318000

脓毒症是由于宿主对感染的反应失调，随着病原体刺激和促炎细胞因子释放，产生损伤微循环功能的全身炎症反应[1]。干扰素基因刺激蛋白（STING）是一种主要分布于内质网的蛋白，常由一些异常的DNA片段触发而激活，从而调控1型干扰素和促炎细胞因子的生成[2]。STING激活可以启动靶向活性自然杀伤细胞（TANK）结合激酶1（TBK1）的磷酸化和激动核因子κB（NF-κB）信号通路[3]。在本研究中建立脓毒症模型，采用电针干预，探讨其对肺损伤的影响和可能的相关机制。

1 材料和方法

1.1 小鼠脓毒症模型和实验分组：选取6～8周C57BL/6小鼠，购买于北京维通利华公司。小鼠腹腔注射脂多糖（LPS，10mg/kg）构建脓毒症模型，假手术组小鼠注射等量生理盐水。实验总共分为3组：假手术组、LPS组、LPS+电针组。

1.2 电针处理：小鼠腹腔注射LPS后1小时，开始电针处理。选取足三里和肺俞穴位，用韩式电针刺激仪连接针灸针刺激30min，频率2/15Hz，电流1mA。

1.3 HE染色：肺组织切片行HE染色。肺损伤评分指标为肺泡壁厚度、肺泡腔充血、血管出血和炎症细胞浸润情况：轻微损伤为损伤程度＜25%；中度损伤为损伤程度25%～50%；重度损伤为损伤程度50%～75%；极重度损伤为损伤程度＞75%。

1.4 肺干湿比检测：取小鼠右上肺叶，称量肺叶重量。接着把肺叶放在60℃烘箱中，72小时后取出称重，把刚取出的肺叶重量与从烘箱中取出的重量相比即为干湿比，用湿重/干重表示。

1.5 Western blot：取小鼠新鲜肺组织，加入RIPA、PMSF和蛋白磷酸酶抑制剂的混合液，用匀浆器匀浆，4℃ 10000rpm离心30min。……