孙子梅林晓燕苏 琴毕胜利

(河北北方学院附属第二医院儿科,河北张家口 075100)

坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)属新生儿最常见亦是最严重的胃肠急症,起病急、病情重且预后差[1];其中肠道黏膜屏障受损导致肠上皮完整性遭到破坏,严重的氧化应激状态可增加肠黏膜通透性,引起炎症失衡、免疫紊乱、炎症水肿等,造成多器官衰竭[2],危害严重。因此,恢复肠上皮完整性对于缓解疾病至关重要。西咪替丁作为临床上治疗NEC 药物,可降低胃肠道酸度、维持肠道内环境,从而治疗NEC[3],对于改善肠黏膜具有极好疗效,但具体机制尚不明确。钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV(CaMKIV)作为免疫调控因子,其激活可促进促炎细胞因子的表达和加重结肠炎的组织学特征[4];环磷酸腺苷反应元件调节蛋白(cyclic AMP response element modulator, CREM)作为CaMKIV 下游基因,在真核生物细胞核中普遍存在,与细胞生长、发育、分泌等多因素相关[5]。推测西咪替丁通过CaMKIV/CREM 通路缓解肠黏膜屏障。因此,建立 NEC 新生大鼠模型,西咪替丁、CaMKIV 抑制剂KN62 分别处理 NEC 新生大鼠,观察二者对NEC 新生大鼠的影响,从而初步探讨西咪替丁对NEC 新生大鼠的保护机制。

1 材料和方法

1.1 实验动物

5 只健康SD 孕鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司[SCXK(京)-2017-0033], 大鼠于我院进行适应性饲养[SYXK(京)-2018-0009],清洁级,自然分娩,同日出生体重>5 g 新生大鼠32 只为研究对象,雌雄不限。在温度(24±1)℃、12 h 光照/12 h 黑暗、通风良好的环境中自由饮水摄食,所有实验均经本院动物实验伦理委员会批准(18020052),每组8 只大鼠即可满足实验要求,且最大限度利用实验动物,即对同一动物采血、取肠组织实验,实验满足3R 原则。