刘珊 方姝煜 综述 安云飞 审校

（重庆医科大学附属儿童医院风湿免疫科/国家儿童健康与疾病临床医学研究中心/儿童发育疾病研究教育部重点实验室/儿童感染免疫重庆市重点实验室，重庆 400014）

［中国当代儿科杂志，2021，23（7）：743-748］

一直以来，精准有效地编辑活细胞基因组DNA是生命科学和医药领域的主要目标。基因编辑技术提供了一种相对快速且简单的方法，实现了对目标基因的删除、替换和修改。随着锌指核酸酶（zinc-finger nuclease，ZFN）、转录激活因子样效应物核酸酶（transcription activator-like effector nuclease，TALEN）、规律间隔成簇短回文重复序列及其相关核酸酶9（clustered regularly interspaced short palindromic repeat/CRISPR-associated nuclease 9，CRISPR/Cas9）等特异性人工核酸酶的出现，该技术逐渐发展为一套较成熟的体系，使得基因相关疾病得以更有效地治疗和预防。原发性免疫缺 陷病（primary immunodeficiency disease，PID）是一类主要由单基因突变导致的免疫细胞发育或功能异常性疾病，免疫重建是根治的关键。基因编辑的出现为PID的治疗提供了新选择。本文将从基因编辑发展沿革入手，概述ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9、碱基编辑和先导编辑，并简述基因编辑在PID中的应用。

1 基因编辑

基因编辑，一种通过删除、插入或替换基因组的某个片段或特定碱基使基因组发生特定变化的分子技术，目前广泛用于生物学研究中［1］。起初该技术通过产生DNA双链断裂（DNA doublestrand breaks，DSB）激活非同源末端连接及同源定向修复等细胞内源性修复机制发挥作用。前者在断裂位点随机引入插入缺失，后者则以供体DNA为模板诱导可预测的基因表达［2-3］。在修复过程中，两种途径同时发生并且相互竞争，但多数情况下以非同源末端连接为主，因此编辑过程中不可避免出现副产物。……