罗晓琴，江 平，程时磊 （青海省人民医院分子病理科，西宁 810007）

叶酸(folic)由蝶啶(pteridine)、对氨基苯甲酸(PABA)和L-谷氨酸(L-glutamic acid)组成，体内叶酸以四氢叶酸(tetrahydrofolate,THF)的形式起作用，5，10-亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetra hydro folate reductase,MTHFR）是叶酸代谢通路中的关键酶之一[1]。据国内外多篇文献记载，体内叶酸利用能力障碍是构成不良孕产的危险因素[2-3]，而叶酸利用能力障碍与编码MTHFR 多态性有关。因此，MTHFR 与神经管畸形、复发性流产和妊娠期高血压的发病率以及不孕症等密切相关[3-5]。本研究致力于探讨青海地区育龄女性MTHFR 在位点C677基因的多态性分布特征，旨在为青海地区育龄女性叶酸个体化补充提供科学依据。

1 对象和方法

1.1 研究对象 本研究选取2016年12月1日～2018年12月7日自青海省人民医院进行叶酸代谢能力检测的汉族及各少数民族育龄女性3 036例，年龄16～52岁，平均年龄29.8岁。其中孕前期及孕期2 008例，不孕症患者1 028例。

1.2 仪器与试剂 本研究所用仪器为美国Applied Biosystems ViiaTM7 Dx Real-Time PCR Instrument，使用深圳奥萨公司的亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C/T检测试剂盒（PCR-荧光探针法）检测。

1.3 研究方法 DNA 提取与PCR 扩增：取受试者清晨空腹静脉血1～2ml，EDTA 抗凝，提取血样的全基因DNA，借助荧光PCR 技术进行检测。反应条件为：50℃ 2min，95℃ 2min，95℃ 15s，60℃1min，共45个循环。

1.4 统计学分析 对本研究人群样本进行哈迪-温伯格定律(Hardy-Weinberg)遗传平衡检验,使用统计分析数据软件SPSS 25.0，对组间基因型及等位基因频率对比采用χ2检验，P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 青海地区孕前或孕早期女性与不孕症女性MTHFR在位点C677基因多态性数据比较 见表1。通过数据比较，青海地区孕前或孕早期女性MTHFR在位点C677的TT 纯合基因型频率（20.72%）与不孕症女性频率（18.68%）接近，差异无统计学意义(χ2=2.52，P=0.28)。……