食管癌组织中lnc RNA DNAJC3-AS1的表达及其与临床病理特征的相关性研究
2021-04-17梁晓虎雷尚昆郭俊霞宝鸡市人民医院胸外肿瘤外科胸外科陕西宝鸡71000宝鸡市中心医院全科医学科陕西宝鸡71008
梁晓虎,雷尚昆,郭俊霞(1.宝鸡市人民医院 a.胸外肿瘤外科;b.胸外科,陕西宝鸡 71000;.宝鸡市中心医院全科医学科,陕西宝鸡 71008)
食管癌(esophageal cancer,EC)是消化道常见的恶性肿瘤[1-3],预后较差[4-6],严重危害人类健康。我国是EC的高发国家,也是世界上EC 新发病例最多的国家[7-8]。近年来研究表明,长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)的表达异常与多种疾病有关,尤其在肿瘤中扮演重要角色。因此,确定肿瘤相关的lncRNA 并且深度解析其生物学功能对阐明肿瘤的发生、发展至关重要。lnc RNADNAJC3-AS1位于染色体13q32.1,含有2个外显子,已有报道指出lnc RNADNAJC3-AS1 与骨肉瘤[9]和乳腺癌[10]密切相关。关于lnc RNADNAJC3-AS1 与EC的关联研究鲜有报道,本研究拟分析EC组织中lnc RNA DNAJC3-AS1的表达及其与临床病理特征的相关性,旨在为EC的临床诊疗提供合理参考。
1 材料与方法
1.1 研究对象 选取2017年6月~2019年5月宝鸡市中心医院全科医学科收集的246例EC患者的肿瘤组织及相应的癌旁正常组织(距离原发灶>5cm)为研究对象,取材后用液氮保存并标记。患者均为食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC),手术前未行免疫治疗、放化疗等抗肿瘤治疗。其中,男性180例,女性66例;年龄33~75岁,平均年龄54.9±13.1岁。本研究经由我院伦理委员会批准,患者自愿参加且均签署知情同意书。
1.2 仪器与试剂 逆转录试剂盒(日本TAKARA公司),ABI7500 PCR 仪(美国ABI),Sybr Green荧光染料(日本TAKARA 公司)。
1.3 方法 从液氮中取适量EC组织标本,充分研磨后,用Trizol 法抽提总RNA,逆转录试剂盒将RNA 逆转录为相应的cDNA,用pfimer 5 软件设计引物,引物设计如下:正向引物5’-TTGCTCT AAGGCAGGTAGGTAA-3’;反向引物:5’-GGG TCTTCCACAATCGCTCT-3’。与Sybr Green 荧光染料配置,使用PCR 仪进行实验,qPCR Mix选用ABI 公司配套的Master Mix,反应体系根据其说明书配置。……
