HSV-TK/GCV系统在体外对胃癌MNK-45细胞株的增殖抑制作用研究
2021-04-17刘红莉苏明权西安市人民医院西安市第四医院检验科西安70004空军军医大学第一附属医院全军临床检验医学研究所西安7003
李 娅,张 赟,刘红莉,皇 海,苏明权,屈 慧(.西安市人民医院(西安市第四医院)检验科,西安 70004;.空军军医大学第一附属医院全军临床检验医学研究所,西安7003)
胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一。尤其在我国和东南亚地区,其发病率与死亡率居于世界癌症前列。胃癌较其它癌症相比起病较为隐匿,发现时一般都错过了最佳治疗时机。研究发现,70%的胃癌患者发现时已经处于进展期或者晚期,失去了手术治疗的机会,导致胃癌的一年生存率都很低。目前胃癌的治疗方法有多种,手术治疗、中医中药治疗以及胃癌的基因治疗等,但效果仍然不佳。
单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK)/丙氧鸟苷(GCV)系统被称为前体药物激活酶,能磷酸化与核苷酸结构相似的GCV,最后形成有很强毒力的代谢产物三磷酸GCV[1]。三磷酸GCV 能够抑制细胞在分裂期基因的合成,还能够使DNA 聚合酶表达降低,对细胞产生杀伤作用[2]。
双歧杆菌属于食品安全级细菌的一种,多用于生物技术的很多方面。双歧杆菌在体内婴儿时期含量最多,随着年龄的增长而丢失。双歧杆菌具有抗衰老、抑制肿瘤、降低血糖血脂、调节免疫等功能。由于双歧杆菌具有较好的安全性,并对肿瘤组织具有靶向性,因此被广泛地应用于肿瘤临床靶向治疗的载体。
1 材料与方法
1.1 材料 pGEX-TK 和pGEX-5X-1 由本课题组前期研究所构建,胃癌MNK-45细胞株RPMI1640培养液、胎牛血清、Transwell 小室、Matrigel 胶、0.25g/dl 胰酶-EDTA 购买于Gibco 公司;Caspaase 3,Bax,Bcl-2,Actin 等购买于Abcam 公司。
1.2 方法
1.2.1 MTS 实验:①将MNK-45细胞种以5×103个细胞/孔的密度种植于96 孔板。……
