鲍全伟，宗兆文,，杨家治，叶 钊，吕明锐，谭 丹△

1.陆军军医大学新桥医院 急诊科(重庆 400037)；2.陆军军医大学 卫勤训练基地战救技能培训教研室(重庆 400038)

脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)是创伤中较为严重的损伤，常伴有较为严重的神经功能障碍，严重影响患者的功能恢复。目前，对于SCI尚无有效的治疗方案，干细胞移植被认为是修复SCI功能损伤最有前景的方法之一[1-2]。研究[3]证实，脊髓中存在神经干细胞(neural stem cells, NSCs)，并可参与SCI修复。如何增强内源性NSCs的修复功能，成为SCI修复的策略之一。基质源性因子-1(stromal-derived factor-1, SDF-1)可刺激NSCs迁移，显示出良好的运用前景[3]，但如何局部高效运用尚缺乏有效手段。本研究拟探讨SDF-1基因修饰的大鼠真皮多能干细胞(dermal multipotent stem cells, dMSCs)移植后对SCI修复的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物

Wistar大鼠购自陆军军医大学动物中心[合格证号：SCXK(渝)20170004]，动物实验、尸体处理按照陆军军医大学动物伦理委员会(执行标准SYXK军2002032)标准实施。

1.2 主要试剂

pAdEasy腺病毒表达载体构建系统由本校解剖教研室董世武博士馈赠，Tripure和DOTAP脂质转染试剂盒购自瑞士Roche公司。细胞培养用培养基、培养瓶、血清等购自美国Hyclone公司。Transwell细胞培养小室购自美国Costar公司，3H-TdR购自中国科学院上海原子核研究所。兔抗SDF-1一抗、藻红蛋白(phycoerythrin, PE)和异硫氰酸荧光素(fluoresceine isothiocyanate, FITC)结合的二抗均购自美国Santa-Cruz公司。维甲酸、地塞米松、IBMX、胰岛素、吲哚美辛购自美国Sigma-Aldrich公司，免疫组化试剂盒购自美国Boster公司。SDF-1 ELISA试剂盒购自德国Phoenix公司。

1.3 大鼠dMSCs的分离培养

采用前期建立的早期贴壁法分离dMSCs[4]。新生1 d Wistar大鼠，引颈处死，酒精消毒，剪取皮肤置于0.25%胰酶消化过夜。……