刘蕾，周颖，袁柳媚，马雁鸿，蒋佳，陈成，潘江，章薇，娄必丹

1 湖南中医药大学 湖南长沙 410007

2 湖南中医药大学第一附属医院 湖南长沙 410007

脑梗死（cerebral infarction）是目前我国成年人的主要致死、致残病因，是造成人均寿命缩短的重要因素[1]。研究发现脑缺血后会导致一系列的级联反应，如细胞膜去极化[2]、细胞能量与代谢障碍[3]、大量兴奋性氨基酸（excitatory aminoacids，EAA）释放[4]，引起急性脑组织坏死与迟发的程序性细胞凋亡，最终形成梗死灶。谷氨酸（glutamic acid，GLU）是兴奋性氨基酸中的主要神经递质，N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartic acid receptor，NMDA）是谷氨酸离子型通道受体中最重要的一种。而NR2A、NR2B是NMDA受体的重要调节亚单位，在脑缺血病程中具有双向调节作用[5-6]，既可以介导神经细胞凋亡通路，也可以激活神经细胞保护通路。针灸治疗缺血性脑卒中一直以来就是中医的优势，研究显示，针灸能促进神经和血管再生[7]、抑制神经细胞凋亡[8]等。本研究以MCAO大鼠为受试对象，探讨电针对脑缺血后不同时期NR2A、NR2B表达的影响。

材料与方法

1 实验动物

SPF级健康SD雄性大鼠60只，体重在240～260g，购买于湖南斯莱克景达实验动物有限公司，许可证编号：SYXK（湘）2015-0008。分笼饲养，室内温度（24±2）℃，相对湿度50%～60%。实验过程中对动物的处置，符合科技部颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》。

2 主要试剂及仪器

2.1 主要试剂 RIPA细胞裂解液（C1053，北京普利莱基因技术有限公司）、BCA蛋白定量试剂盒（BCA Protein Assay Kit，CW0014S，康 为 世 纪）、PVDF膜（IPVH00010，Millipore）、封闭专用脱脂奶粉（P1622，北京普利莱基因技术有限公司）。内参一、二抗：Mouse Monoclonal Anti-Actin（TA-09，中 杉 金 桥，1/2000）、辣根酶标记山羊抗鼠IgG（ZB-2305，中杉金桥，1/5000）。……