祁月，张叶，郭乃凤，张光第，戴厚永

（南通大学附属医院肾内科，江苏226001）

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病常见的慢性微血管并发症之一。在西方国家DN是终末期肾衰竭（ESRD）的首要病因，在我国糖尿病相关慢性肾脏病患者逐年增多，2016年已达2 430万人，预计未来几年DN也将是我国ESRD的首要病因[1]。DN严重影响患者预后，积极研究DN发病机制对防治DN具有重要意义。DN发病机制复杂，仍未完全阐明，目前认为足细胞损伤在DN发病中发挥关键作用，是研究的重点内容[2-3]。

Klotho是一种与衰老有关的蛋白，目前发现Klotho蛋白有α、β和γ三种类型，常说的Klotho蛋白即指α型。除抗衰老作用外，Klotho蛋白还有抑制胰岛素/类胰岛素生长因子1（IGF-1）信号传导途径和Wnt信号，调节钙和磷稳态，调节甲状旁腺激素（PTH）分泌，抗氧化应激，抑制细胞炎症和凋亡，促进自噬，抑制纤维化等作用[4]。研究发现肾脏不仅是全身Klotho的主要来源，而且是清除循环中Klotho的主要器官[5-6]。Klotho主要表达于远曲小管[5]，近年来发现在足细胞也有Klotho表达[7]。研究发现，外源性Klotho通过抑制足细胞TRPC6通道Ca2+内流而减轻蛋白尿，有关Klotho对足细胞的保护作用逐渐引起学者们的重视[7]。既往我们研究发现抑制足细胞β-catenin能减轻高糖诱导的足细胞上皮间质转分化[8]，本实验拟探讨Klotho是否能通过抑制足细胞β-catenin表达而减轻足细胞损伤，为临床防治DN提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 足细胞培养及干预从液氮罐中取出冻存的小鼠永生系足细胞（美国Mundel教授惠赠），复苏后加入新鲜培养液吹散细胞，接种至涂有Ⅰ型胶原的25 cm2培养瓶，用含10%胎牛血清（美国Gibco）的RPMI 1640培养基，添加小鼠重组γ-IFN 10 U/mL（美国PeproTech），在33℃许可条件下培养，隔天换液。……