黄丽，康哲，翟素珍，张春林，蔡莉

(1.贵州医科大学 基础医学院 生物学系，贵州 贵阳 550025；2.贵阳市白云区医院 妇产科，贵州 贵阳 550014)

肺癌是我国乃至全世界发病率和致死率最高的恶性肿瘤，其中肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)是肺癌中最主要的病理类型，占所有肺癌患者的80%～85%[1]，其治疗亦是全球性的一大难题[2-4]。近年来，中药治疗与手术、放疗及化疗相比，具有多环节、多成分、多靶点效应及减毒增效的优势[5-8]。美洲大蠊(periplanetaamericanaL.)俗称“蟑螂”，是一种蜚蠊科昆虫[9]。美洲大蠊入药在《神农本草经》中已经记载[10]，至今以其为原料已研制出多种新药，如心脉龙注射液、康复新液、肝龙胶囊及癥益肝片等[11]。众多研究表明，美洲大蠊提取物(periplanetaamericanaextract,PAE)具有抗氧化、抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的药理活性[12-14]。目前PAE在肺癌方面的研究少有报道[15]，且具体的作用机制尚不完全清楚。本研究以人LUAD HCC-2935细胞为研究对象，探究PAE对HCC-2935细胞增殖、周期及凋亡的影响，为PAE应用于LUAD的临床治疗提供新的基础理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞株与成虫 人LUAD细胞株HCC-2935由贵州医科大学分子生物学重点实验室惠赠，美洲大蠊成虫取自贵州医科大学基础医学院生物学系蜚蠊养殖房，PAE经90%乙醇冷浸提取获得。

1.1.2主要试剂与仪器 RPMI-1640培养基(美国Gibco)，胰蛋白酶和胎牛血清(美国Sigma)，二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)、四唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)细胞凋亡检测试剂盒和细胞凋亡荧光Hoechst 33342/PI(propidium iodide，PI)双染试剂盒(北京Solarbio)，顺铂(上海恒远)；ELX808酶标仪(瑞士宝特)，BDS200倒置生物学显微镜(重庆奥特)，流式细胞仪(美国NovoCyte)，371直热式CO2恒温培养箱(美国Thermo)，QL 901旋涡振荡器(海门市麒麟医用仪器)。……