王蓝晨，王昱，王颖，杨仕赛，朱贵明

(贵州医科大学 生物与工程学院 实验中心，贵州 贵阳 550025)

家蝇(MuscadomesticaL.)属于完全变态昆虫，是世界大部分地区最常见的一种昆虫[1]。家蝇具有生育能力强、生命周期短、易于高密度培养等特点，且育种技术简单，饲料来源丰富，已被列为世界上新的蛋白质资源昆虫[2-4]。因此将家蝇作为一种新型的转基因生物反应器进行研究，具有广阔的发展前景。昆虫转基因技术是利用功能基因开发新昆虫品种的关键，也是实现昆虫有用蛋白质合成和生物反应器开发的关键技术[5-6]。外源基因能否成功表达，启动子的选择显得尤其重要[7]。目前，对家蝇的转基因研究相对不成熟，技术体系的建立尚不完善，仍缺乏能够实现外源基因高效表达的理想启动子。在果蝇和家蚕中，肌动蛋白(Actin)是一种具有收缩特性的高度保守的组成型蛋白[8]，肌动蛋白除存在于肌肉细胞中，还是细胞骨架的重要组成部分、参与细胞迁移、染色体分离及细胞内大分子转运等[9]。肌动蛋白5C(Actin-5C)属细胞质肌动蛋白，通常认为将它祝为表达外源目的基因的启动子比较合适[10-11]。本研究使用多种预测工具预测Actin-5C启动子区，并克隆预测调控区域，重组到含萤火虫荧光素酶的报告基因pGL3-Basic载体上，为进行下一步的实验研究筛选出启动子活性最强的家蝇Actin-5C启动子的调控区域。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1家蝇及细胞来源 供试虫源家蝇由贵州医科大学生物与工程学院昆虫房饲养，温度25～28 ℃，湿度70%，光照周期12 L ∶12 D。……