刘晓 李若瑜 宋营改

(北京大学第一医院皮肤科，北京大学真菌和真菌病研究中心，北京市皮肤病分子诊断重点实验室，国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心，北京 100034)

真菌感染是一个全球关注的人类健康问题。侵袭性真菌感染(invasive fungal infection, IFI)在重症患者及免疫抑制人群中具有较高的发病率和病死率[1-3],以念珠菌感染最常见，可达53%[4]，其次为曲霉、毛霉及隐球菌[5]。侵袭性曲霉病及毛霉病临床表现缺乏特异性，病原学诊断困难，往往术后或尸检才能诊断，缺少精确的诊断方法。组织病理学是诊断侵袭性真菌感染的金标准之一。由于不同真菌在组织中的形态类似，仅通过HE染色、各种特殊染色方法观察真菌形态特征来鉴定感染真菌的属和种比较困难，尤其是难以区分曲霉、毛霉、镰刀菌及赛多孢霉等丝状真菌感染[6]。福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织中病原真菌的早期诊断并将致病菌种鉴定至种，对提高诊断水平、精准治疗及改善预后至关重要。分子病理诊断是准确诊断病原真菌的重要检测手段，现对侵袭性真菌感染分子病理诊断方法的研究进展进行综述。

1 FFPE组织中聚合酶链式反应(PCR)及产物分析

PCR技术作为诊断FFPE组织中真菌感染的分子诊断方法之一，具有高效、快速、准确的特点。

2017年ESCMID-ECMM-ERS[欧洲临床微生物与感染性疾病学会(ESCMID)-欧洲医学真菌学联盟(ECMM)-欧洲呼吸学会(ERS)]指定的曲霉病诊断和治疗指南[7]中指出：宽范围(broad-range) PCR用于鉴别可见菌丝的新鲜组织或石蜡包埋组织中真菌的种、属具有较高证据等级(AII级)，而对于未见菌丝的活检组织则属于CII级。……