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亮菌多糖对LPS诱导的肠上皮细胞炎性损伤的保护作用及机制探讨

2021-04-09朱耀东

安徽医科大学学报 2021年4期
关键词:检测

张 梅,吴 悦,苏 丽,朱耀东,李 平,王 婷

肠黏膜屏障作为机体最重要的屏障之一,能够抵御毒素和肠外病原体预防炎症的发生。多种因素均可以导致该屏障的损害,如临床上化疗性肠黏膜损伤(chemotherapy-induced intestinal mucosal injury, CIMI),严重影响了患者的治疗效果,甚至缩短生存期。对于CIMI 的防治,集中在症状控制上,不能从根源上解决障碍。因此,寻找防治CIMI 的有效手段已成为目前肿瘤学领域研究的热点问题。

亮菌口服液(

Armillariella

oral solution, AOS)是一种拥有完全知识产权的中成药,临床上被用于放化疗引起的白细胞减少的辅助治疗等。AOS能够缓解5-FU 诱导的小鼠肠黏膜的损伤。亮菌多糖(

Armillariella

tabescens polysaccharides, ATPS)作为其中最主要成分,研究表明其能够保护顺铂所导致的小鼠肠黏膜损伤。然而,ATPS 如何保护肠黏膜损伤的分子机制尚未有报道。现通过体外构建细菌脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的IEC-6 肠上皮细胞损伤为模型,观察ATPS 对肠上皮细胞活性以及紧密连接蛋白表达的影响,并探讨ATPS对肠上皮细胞功能损伤的保护作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要仪器

全自动酶标仪(Molecular Devices公司,美国);荧光共聚焦显微镜(Laica公司,德国);凝胶成像仪(Bio-Rad公司,美国);EPS300 型电泳仪(北京天龙公司,中国);流式细胞仪(Beckman Coulter FC500公司,美国);超净工作台(苏州净化公司,中国);光学倒置显微镜(Olympus公司,日本);细胞培养箱(Sanyo公司,日本);微量取样枪(Eppendorf公司,德国);恒温摇床(北京六一生物科技有限公司,中国);低温高速离心机(安徽中科中佳科学仪器有限公司,中国)。

1.2 主要试剂

大鼠肠上皮细胞系IEC-6 购自ATCC 细胞库;ATPS购自合肥诚志生物制药有限公司公司;……
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