刘学停，蔡 军，孙艳军，孙登群，吴文涌

胆囊癌是发生于胆囊及胆囊管的恶性肿瘤，起病隐匿且恶性程度高，临床治疗效果不佳、预后极差。胆囊癌手术切除后容易发生转移，对放化疗敏感性较差，目前尚缺乏能够有效杀伤胆囊癌细胞、延长胆囊癌患者生存时间的治疗手段。胆囊癌的发病机制复杂，癌细胞极强的迁移和侵袭能力是造成肿瘤转移的重要生物学行为，但调控胆囊癌细胞迁移、侵袭的关键分子尚未阐明，因此也缺乏相应的靶向治疗方式。微小RNA(microRNAs，miRs)是一种在转录后水平调控多种基因表达的非编码小分子RNA，在多种恶性肿瘤的发生发展中，存在多种miRs表达的上调或下调。miR-181是一种具有促癌活性的miR，已经被证实在结直肠癌、食管癌、胆囊癌等多种消化系统恶性肿瘤中呈高表达趋势；国内何政 等细胞实验表明了miR-181对胆囊癌细胞迁移和侵袭的促进作用，但具体的机制及miR-181在活体水平促进胆囊癌生长的作用仍未见报道。

金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor of metalloproteinases 3，TIMP3)是迁移和侵袭的抑制分子，通过抑制多种金属蛋白酶对细胞外基质的水解作用来使细胞的迁移和侵袭受到抑制。在胆囊癌中，TIMP3的表达下调；在Targetscan网站中进行的生物信息学分析则显示TIMP3基因mRNA的3′UTR中含有miR-181的结合位点，从生物信息学角度推测miR-181能够靶向抑制TIMP3并起到促进癌细胞迁移、侵袭的作用。基于此，该实验将以胆囊癌GBC-SD细胞为实验对象，具体分析了miR-181靶向TIMP3调控细胞迁移及侵袭的作用。

1 材料与方法

1.1 细胞