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大黄鱼小清蛋白提取工艺优化及免疫印迹分析

2021-04-07吕春霞杨留明陈世达张慧恩

食品与机械 2021年3期

吕春霞 杨留明 陈世达 张慧恩 杨 华

(浙江万里学院,浙江 宁波 315100)

大黄鱼(Pseudosciaenacrocea),硬骨鱼纲鲈形目石首鱼科黄鱼属[1],俗称黄花鱼、桂花鱼等,是中国近海主要的经济鱼类[2]。但是其含有致敏原小清蛋白,可对人体产生过敏反应。

水产食物的主要过敏原多属糖蛋白,其热稳定性较高,分子量为10~70 kD,如小清蛋白、原肌球蛋白、精氨酸激酶、肌钙结合蛋白等[3]。小清蛋白(parvalbumin, PV)是多数鱼类中确定的主要过敏原[4-6],其中大部分为硬骨鱼类。研究表明,鳕鱼过敏原中的4个抗原亚组分中,pI 4.75的过敏原M即为PV[7-8],是鳕鱼的主要过敏原[9]。Kobayashi等[10-11]在沙丁鱼、马鲛鱼、红绸鱼及太平洋鲭等鱼类的白色肌肉组织中发现了含量丰富的PV,其深色肌肉组织中也有较低浓度的PV。

小清蛋白是稳定性较高的蛋白,对酸碱度、温度和各种变性剂都有很强的耐受性,由于小清蛋白分子构象、折叠能力和抗原表位的不同及特殊性,其在酶解和高温条件下均很稳定,并仍具有过敏性[12-13]。蛋白质会受到游离基作用发生氧化,从而改变其蛋白功能特性[14]6-7,而脂质过氧化反应产生的自由基迁移可诱导蛋白质聚集。目前国内外有关小清蛋白的研究[15-16]较多,而关于大黄鱼小清蛋白的研究较少,吴玟静等[17]以阿拉斯加狭鳕、蓝点马鲛、大黄鱼等7种鱼为原料,证明了鱼类过敏原主要为48~57,33~41,28,17 kU的蛋白,并通过间接ELISA和抑制性ELISA证实了不同鱼类蛋白之间存在强烈的交叉反应。目前由过敏原直接引起的过敏性疾病呈大幅增加趋势[18]。试验拟先对大黄鱼小清蛋白的提取工艺进行优化,并对其进行免疫印迹试验,以期为后续大黄鱼小清蛋白的理化特性及致敏机理的确定提供依据。……

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