骨形态发生蛋白7 通过调节GSK⁃3β 活性对心肌梗死后大鼠心肌纤维化的影响
2021-04-07余平梁鹏庞诗锋袁文健黄巧娟
余平 梁鹏 庞诗锋 袁文健 黄巧娟
持续过度的心肌重构是心肌梗死发展成充血性心力衰竭的重要病理机制,而心肌纤维化是心肌重构的关键环节[1]。因此,有效抑制心肌纤维化可能是心肌梗死后治疗的关键。既往研究表明,BMP7 具有抗炎、抗凋亡、抗纤维化的作用,并在心脏疾病中发挥重要作用,但其抗心肌纤维化可能涉及的机制尚不清楚[2,3]。因此本研究通过制备心肌梗死大鼠模型,旨在探究BMP7 对心肌梗死后心肌纤维化的影响及可能的机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物 22 只健康雄性Sprague⁃Dawley 大鼠(SD rats),体重230-250 g,由广西医科大学实验中心提供。
1.2 主要试剂及仪器 人重组骨形态发生蛋白7(BMP7,北京博奥森生物科技有限公司),p⁃GSK⁃3β抗体(英国Abcam 公司),TGF⁃β1 抗体(英国Abcam公司),β⁃Actin 抗体(美国CST 公司),Masson 染色试剂盒(北京博奥森生物科技有限公司),ALC⁃V9动物呼吸机(上海奥尔科特生物科技有限公司)
1.3 心梗模型制备 根据Curaj[4]等的方法构建心梗模型。通过腹腔注射2%戊巴比妥钠(3 ml/kg)麻醉大鼠,行经口气管插管并连接动物呼吸机辅助呼吸,在左侧胸壁第3-4 肋间处备皮、开胸,暴露心脏,于左心耳根部下方2-3 mm 处用6-0 缝合线结扎左前降支,结扎后见左室前壁及心尖部变白,心脏搏动减弱,心电图示ST 段抬高,即表示造模成功。术毕,形成胸腔负压,逐层关闭胸腔后肌肉注射2.5×104U 青霉素预防感染。假手术组大鼠进行相同手术操作,仅不结扎左前降支。
1.4 动物分组与处理 将术后成功存活12 h 的大鼠随机分为2 组,分别为MI 组和MI+BMP7 组,每组8 只。另外选择6 只正常SD 大鼠作为Sham组。……
