符佳颖 陈旭翔 许岱诗 刘欣 杨欢 周长青 吴海东 曾朝涛吴浩 郑光辉 王彤*

近年来，骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells，MSCs）移植治疗心肌梗死的优越性得到了广泛关注。MSCs 移植已被证实能够有效缩小心肌梗死面积、形成新生血管、改善心室重塑、提高患者的心功能［1］。然而，多项临床试验指出MSCs 在移植后受到局部梗死微环境的影响导致生存能力低下，未能达到理想的治疗效果［2］。因此，如何提高MSCs 在缺氧环境下的生存能力是干细胞移植亟需解决的关键问题。ELABELA（ELA）是一种内源性肽类激素，课题组前期的实验表明ELA 能够通过改善和促进MSCs 的细胞增殖和迁移能力［3］。但ELA 是否能够提高MSCs 抵抗氧化应激损伤的能力需要进一步验证。本实验通过采用过氧化氢（H2O2）诱导MSCs 凋亡，探讨ELA 对MSCs 氧化应激损伤的影响及其最佳治疗浓度。

1 材料与方法

1.1 材料 SPF 级Sprague Dawley（SD）大鼠，体质量（100±20）克，购于广州中医药大学动物实验中心，许可证号：SCXK（粤）2018-0034。实验中对动物处理方法取得中山大学伦理委员会批准，批准号：2019-057-01。

1.2 方法 （1）细胞培养根据课题组已建立成熟的 方 法 进 行 分 离、培 养 及 鉴 定MSCs［4］。第3 代MSCs 用于后续实验研究。（2）细胞分组及H2O2诱导细胞凋亡模型建立将体外培养的MSCs 随机分为Control 组、H2O2组、500 nM ELA 组，1 μM ELA 组，5 μM ELA 组，10 μM ELA 组。H2O2组 细 胞 加 入 含400 μM H2O2的无血清培养基，在37℃条件下培养6 h，建立H2O2诱导细胞凋亡模型，模拟心肌梗死后体内氧化应激微环境［5］。Control 组加入等量PBS；500 nM ELA 组，1 μM ELA 组，5 μM ELA 组，10 μM ELA 组各自加入不同浓度ELA（500 nM，1 μM，5 μM，10 μM）后进行H2O2诱导细胞凋亡。（3）MTS 法检测细胞增殖及细胞活力将MSCs 按3×103 个/孔接种到96 孔板，每孔100 μl，待细胞贴壁。……