羊丹，徐菁，陈保银，马竹芳

三二〇一医院，陕西汉中723000

肝细胞癌（HCC）是肝脏肿瘤最常见的类型［1-2］。现有的治疗方法对晚期HCC患者的疗效有限［3］。增殖和转移被认为是恶性肿瘤两个最重要的生物学特征，是肿瘤进展的重要原因［4］。研究HCC 进展相关机制将有助于进一步探索新的治疗靶点。长链非编码RNA（lncRNA）已被证明与HCC 的进展有关，随着高通量测序等技术的发展，越来越多新的lncRNA被发现［5］。DEAD/DEAH 盒解旋酶11 反义RNA1（DDX11-AS1）是与肿瘤密切相关的lncRNA之一，在胃癌、食管癌和骨肉瘤等多种肿瘤中高表达［6-8］。SHI 等［9］研究发现，DDX11-AS1 在HCC 中表达上调，与患者预后不良相关，可能是HCC 治疗的潜在靶点。但DDX11-AS1是否与HCC的增殖和侵袭相关，目前仍不明确。2018 年8 月—2020 年1 月，本研究观察了DDX11-AS1对HCC细胞增殖和侵袭的影响，并探讨可能机制。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 细胞与主要实验材料 人HCC 细胞HepG2、Huh-7、SK-hep-1 及正常肝细胞LO2 购自中国科学院。DMEM 高糖培养基和胎牛血清购自美国Gibco公司。TRIzol 试剂购自日本TaKaRa 公司。ULtraRT一步法RT-PCR 试剂盒购自北京百奥莱博公司。DDX11-AS1 siRNA 购自广州锐博生物生物技术有限公司。MTS 试剂购自美国Biovision 公司。Tran⁃swell小室购自美国Coring公司。蛋白裂解液和蛋白浓度检测试剂盒购自上海碧云天生物有限公司。PI3K、pPI3K、AKT、pAKT 和GAPDH 抗体购自英国Abcam 公司。PI3K/AKT 信号通路激活剂SC79购自皓元生物技术有限公司。

1.2 不同HCC 细胞DDX11-AS1 检测 将HepG2、Huh-7、SK-hep-1 及LO2 细胞接种于含10% 胎牛血清的基础培养基中，于37 ℃、5% CO2全湿培养箱中培养。细胞长满时弃掉培养基，PBS 洗3 次，加入TRIzol 试剂，完全裂解细胞，并依次加入氯仿、异丙醇和无水乙醇离心后获取细胞中总RNA。……