田东浩 许文耀 余 辉 杨薇粒 郑百俊 高 亚 潘伟康

先天性巨结肠（Hirschsprung"s disease，HSCR）是最常见的先天性胃肠神经系统疾病之一，活产儿中发病率为1／5 000，男性发病率约为女性的4 倍，主要临床表现为病变肠管痉挛、肠内容物通过受阻引起下消化道梗阻；病理学改变为病变肠管神经节缺如以及神经纤维增粗、增多［1-4］。 其发病机制为胚胎第3 ～12 周时来自迷走神经的肠神经嵴前体细胞（enteric neural crest cells，ENCCs）沿头向尾方向迁移障碍所致［5-7］。 研究表明，多基因如SOX10、NRG1、RET、SIP1、GDNF 等参与HSCR 的发生过程，但其确切发病机制仍未完全清楚［8］。

MicroRNA （miRNA） 是内源性小分子非编码RNA，大小为19 ～25 bp，以直接结合靶基因mRNA的3"-非翻译区（3"-UTR）阻遏翻译和（或）诱导mRNA 降解的方式，参与调控细胞周期、分化、迁徙和凋亡以及能量代谢等多种细胞活动［9-11］。 既往研究表明，HSCR 患者肠组织中存在大量异常表达的miRNA，如miR-206［12，13］、miR-192／215［14］、miR-140-5p［15］和miR-132／212［16］等，它们可能与HSCR 发生相关。 研究表明，miR-939 可通过靶向HDGF 诱导WNT／β-Catenin 途径失活，还可通过靶向IGF-1R 诱导PI3K／Akt 途径失活，进而调控癌细胞增殖、迁移和凋亡，发挥抑癌作用［17，18］。 陈广林等报道miR-939 可靶向LRSAM1 并抑制HSCR 中ENCCs 增殖［19］。 SOX4 为SOX （Sry-related HMG box） 转录因子家族成员之一，广泛参与胚胎期神经元发育、轴突形成、神经元映射以及生殖系统发育等过程。有报道显示，SOX4 可能通过Notch 信号通路调控Mash1、Ngn1 和Ngn2 转录因子表达，并与SOX11 发挥协同作用［20］。 本课题组前期研究发现SOX4 在HSCR 患者肠组织中低表达［21］。 目前尚不清楚miR-939 对SOX4 的调控及二者对ENCCs 功能表型的影响，以及miR-939／SOX4 在HSCR 发病中的机制。

本研究拟通过检测miR-939 和SOX4 在HSCR患者肠组织中的表达水平，评估miR-939 对SOX4表达调控作用，以及miR-939、SOX4 对ENCCs 增殖、凋亡和迁移的影响，并探讨miR-939／SOX4 在HSCR 干预治疗中的潜在价值。……