李 丽，陈 菲，包春娟，周琪琪，包 骥

在牙齿及骨骼外出现的钙沉积均为病理性钙盐沉积。草酸钙结晶性肾损伤的发病机制及其治疗靶点的基础研究中，实验大鼠肾组织内沉积的草酸钙结晶在HE染色中不易观察，借助Von Kossa钙盐染色法对实验动物行钙盐特殊染色，以便半定量统计各肾脏组织内草酸钙结晶的量。Von Kossa钙盐染色法是一种金属置换法，硝酸银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时，钙被银置换，银盐在光的作用下被还原为黑色金属银，钙盐沉积处染色为黑色。Von Kossa钙盐染色法中最关键的硝酸银溶液染色步骤需要阳光照射，传统方法是将其置于阳光下或60 W灯泡前，放置1 h或更长时间，整个染色步骤耗时长且不容易控制。36 W四灯管紫外光固化灯具有光照能量大、强度稳定、180°照射、不留死角等优点，主要用于手机主板焊盘绿油快速固化。本文现介绍一种改良的36 W紫外光固化灯加速Von Kossa钙盐染色法，与传统方法相比，其操作简单、染色快且背景干净，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1 材料(1)样本制片：草酸钙结晶实验大鼠50只，肾脏组织离体后立即置于10%中性福尔马林固定48 h，常规石蜡包埋后行4 μm厚连续切片3张，65 ℃烤片1 h，常规脱蜡至流水冲洗后放入双蒸水中待染，1张切片常规行HE染色，剩下2张切片分别用传统方法和改良方法行Von Kossa钙盐染色法。(2)试剂：Von Kossa钙盐染色法试剂盒购自北京索莱宝公司(G3282)，苏木精染液购自Thermo公司(7211)。(3)耗材：Super PAP Pen超级免疫组化油笔购自福州迈新公司(PEN-0002)。(4)小型设备：国产36 W快速紫外光固化灯(SS-818)。……