刘贲 李旭梅 戴曦 袁竞 詹倩 王荣丽

特发性肺纤维化( IPF)是一种常见的慢性进行性呼吸系统疾病，以肺泡上皮细胞损伤、成纤维细胞/肌成纤维细胞聚集和细胞外基质沉积为特征[1]。病因及病理生理过程复杂，尚无有效的临床治疗手段。既往研究表明氧化应激和过度炎症反应在肺纤维化中起到重要作用[2]，而内质网应激(ERS)与氧化应激反应、细胞凋亡有着紧密关系,并与炎症相互关联[3-4]，过度的ERS还会增加肺纤维化的易感性[5]，ERS与肺纤维化似乎有密切联系。在ERS级联反应中，GRP78的表达上调被认为是ERS和UPR的激活标志[6]。持续的ERS刺激Derlin-1的表达，参与ERAD缓解ERS，避免细胞凋亡[7-8]。本研究通过分析Derlin-1和GRP78在肺纤维化动物模型中的的表达，探讨ERS在肺纤维化过程中的作用，寻找新的诊疗靶点。

资料和方法

一、实验动物、药品、试剂

清洁健康雄性SD大鼠50只，8～10周龄，体质量(210±10)g，购于西南医科大学动物实验中心，常规饲养1周后进行造模。质量浓度20%的百草枯(先正达南通作物保护有限公司)；Masson三色染色试剂盒(北京雷根生物科技有限公司)；DERLIN-1抗体(北京布尔森股份有限公司)；GRP78抗体(美国BioWorld公司)；SP试剂盒(迈新公司)；ELISA试剂盒(R&D公司)。

二、模型制备

将50只大鼠随机分为染毒组和对照组，染毒组根据染毒后不同时间随机分为Day1、Day7、Day14、Day21共4个亚组，每组均为10只。染毒组通过腹腔注射15 mg/kg剂量百草枯诱导小鼠肺纤维化；对照组腹腔注射等量生理盐水。通过观察大鼠食欲不振、反应迟缓、斜视、垂发、身体卷曲、缺乏运动和呼吸困难等现象判断造模是否成功，剔除不符合判定标准或死亡模型后，每组最终有6只大鼠纳入研究结果分析。……