田东梅，廖海霞，王雪娇,李亨利，尹 欣，朱明辉

(成都中医药大学医学与生命科学学院/附属生殖妇幼医院，四川 成都 610000)

京尼平属环烯醚萜类物质，由传统中药——杜仲等提取的京尼平苷经β-葡萄糖苷酶水解而成，是一种很好的炎症抑制剂[1]。有研究发现，京尼平在抗肿瘤、抗血栓、抗炎和治疗糖尿病等方面均具有显著疗效[2-3]。在生殖内分泌疾病中，多囊卵巢综合征是一种常见疾病，常伴慢性炎症和氧化应激[4-5]。有研究表明，多囊卵巢综合征患者卵巢组织局部存在慢性炎性反应，主要是由于产生了过量的肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6(IL-6)等，并激活核因子κB(NF-κB)，从而引发颗粒细胞过早凋亡，抑制了优势卵泡的形成[6]。如何改善多囊卵巢综合征患者的炎症状态，对其治疗具有积极的意义。本研究利用脂多糖(LPS)模拟了人卵巢颗粒细胞系(KGN细胞株)的氧化应激状态，探索了京尼平可能的抗炎作用。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1细胞株来源 KGN细胞株由中国科学院成都生物研究所王飞教授惠赠。

1.1.2试剂与仪器 京尼平为北京索莱宝科技有限公司产品；CCK-8为日本同仁化学研究生产品，雌激素酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒、IL-4、IL-5、IL-1β、IL-6 ELISA试剂盒购自贝斯维斯公司，线粒体解偶联蛋白2(UCP2)、NF-κB抗体购自proteintech，17α羟化酶(CYP17A1)、芳香化酶(CYP19A1)抗体购自affinity，辣根过氧化物酶标记的二抗购自武汉三鹰生物技术有限公司，杜氏改良Eagle培养基/F12培养基购自美国Gibco公司，电泳仪(型号Power Pac Basic)、酶标仪(型号iMarkTMMicroplate reader)均购自美国Bio-rad公司。

1.2方法

1.2.1细胞培养与分组 KGN细胞株培养采用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基、10%胎牛血清、100 U/mL青霉素和100μ/mL链霉素，置于37 ℃、5%二氧化碳培养箱中培养。……